[发明专利]含TFPI基因与GFP基因双顺反子的逆转录病毒真核表达载体及构建方法及应用无效
| 申请号： | 201010159669.7 | 申请日： | 2010-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN101857877A | 公开（公告）日： | 2010-10-13 |
| 发明（设计）人： | 冷希岗;王海燕;宋丽萍;朱敦皖;刘兰霞;董霞;张海玲 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院生物医学工程研究所 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66;C12N5/10 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300192 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了含TFPI基因与GFP基因双顺反子的逆转录病毒真核表达载体及构建方法及应用，含TFPI基因与GFP基因双顺反子的逆转录病毒真核表达载体用下述方法制成：以序列表SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所述序列为引物，pIRES-TFPI为模板，扩增出以序列表SEQ ID NO.1所示的人类组织因子途径抑制因子基因的全长cDNA，将其插入到逆转录病毒载体pMSCV-IRES-GFP中，获得pMSCV-TFPI-IRES-GFP重组质粒，实现了TFPI和绿色荧光蛋白在EPCs内的非融合表达，两种蛋白之间功能互不干扰。在正常发挥TFPI生物学功能的同时，GFP的表达可作为转基因细胞的有效示踪手段，为研究携带TFPI基因的EPCs在体内的组织定位及分化情况提供了极大便利。 | ||
| 搜索关键词： | tfpi 基因 gfp 顺反子 逆转录 病毒 表达 载体 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
含人组织因子途径抑制因子基因与绿色荧光蛋白基因双顺反子的逆转录病毒真核表达载体，其特征是用下述方法制成：以序列表SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所述序列为PCR引物，pIRES-TFPI为模板，扩增出以序列表SEQ ID NO.1所示的人类组织因子途径抑制因子基因的全长cDNA，将其插入到逆转录病毒载体pMSCV-IRES-GFP中，获得pMSCV-TFPI-IRES-GFP重组质粒。
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