[发明专利]BRAF基因突变检测特异性引物和液相芯片有效
申请号: | 201010160760.0 | 申请日: | 2010-04-23 |
公开(公告)号: | CN102234684A | 公开(公告)日: | 2011-11-09 |
发明(设计)人: | 许嘉森;李国强;余刚;秦会娟 | 申请(专利权)人: | 广州益善生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香;曾旻辉 |
地址: | 510663 广东省广州市广州科*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种BRAF基因突变检测液相芯片,主要包括有,(A)针对BRAF的V600E突变位点,分别设计的野生型和突变型ASPE引物对:每种ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物组成,特异性引物的3’端的最后3位碱基中的一个碱基为突变位点,所述特异性引物的Tm值在52~58℃之间;分别包被有特异的anti-tag序列的、具有不同颜色编码的2种微球所述anti-tag序列能相应地与(A)中所选的tag序列互补配对;用于扩增具有V600E突变位点的BRAF基因目标序列的扩增引物。本发明所制备的BRAF基因突变检测液相芯片具有非常好的信号-噪声比,并且所设计的探针以及anti-tag序列之间基本上不存在交叉反应。 | ||
搜索关键词: | braf 基因突变 检测 特异性 引物 芯片 | ||
【主权项】:
一种BRAF基因突变检测液相芯片,其特征是,主要包括有,(A)针对BRAF的V600E突变位点,分别设计的野生型和突变型ASPE引物对:每种ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物组成,所述tag序列选自SEQ IDNO.25~SEQ ID NO.30中的任2条序列;所述特异性引物是来源于SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2或其反向互补序列中的碱基序列,且特异性引物的3’端的最后3位碱基中的一个碱基为突变位点,所述特异性引物的Tm值在52~58℃之间;(B)分别包被有特异的anti‑tag序列的、具有不同颜色编码的2种微球,所述anti‑tag序列选自SEQ ID NO.31~SEQ ID NO.36中的序列,且所述anti‑tag序列能相应地与(A)中所选的tag序列互补配对;(C)用于扩增具有V600E突变位点的BRAF基因目标序列的扩增引物。
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