[发明专利]一种越橘治疗呼吸道系统疾病有效部位的质量控制方法

摘要

本发明涉及天然药物质量检测领域，具体来说为一种越橘活性提取物的质量控制方法。本发明建立了越橘的活性提取物的质量控制方法，包括性状，鉴别，水分、炽灼残渣、重金属、砷盐、有机溶媒残留、熊果苷含量测定，总黄酮含量测定，金丝桃苷含量测定。本方法具有良好的重现性和可靠性，可全面控制续越橘提取物以及其制剂的质量。

主权项

一种对越橘提取物的质量控制方法，包括以下步骤：性状、鉴别、水分、炽灼残渣、重金属、砷盐、有机溶媒残留检查、熊果苷含量测定，总黄酮含量测定，金丝桃苷含量测定，其特征是：(1)本品性状为棕褐色干浸膏；气微，味苦。(2)鉴别方法为薄层色谱法：以氯仿(6～9分)-甲醇(1～3份)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液后，晾干，100～110℃烘至斑点显色清晰。供试品溶液在与对照品溶液相应的位置上，显相同颜色的斑点。其中对照品溶液配制方法为：熊果苷对照品适量用乙醇制成1ml含1mg的溶液；其中供试品溶液配制方法为：取本品粉末2g，加入甲醇5ml，超声使完全溶解，溶液作为供试品溶液。(3)检查项内容包括水分、炽灼残渣、重金属、砷盐、有机溶媒残留检查，按照中国药典2005年版一部附录要求的方法测定；(4)熊果苷含量测定包括以下步骤：分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定，其特征是：色谱条件为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(13～18∶87～82)溶液为流动相；流速0.8～1.0ml/min；检测波长为278～285nm。理论板数按熊果苷峰计算，应不低于2000。其中对照品溶液的制备方法为：精密称取熊果苷对照品适量，加乙醇制成每1ml含40～80μg的溶液，即得。其中供试品溶液的制备方法为：取越橘提取物粉末80～120mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，经0.45um微孔滤膜过滤，即得。(5)总黄酮的测定包括以下步骤：分别制备供试品溶液和对照品溶液，500～520nm波长处测定吸收度。其中对照品溶液的制备方法为：取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含金丝桃苷165～215μg的溶液，摇匀。分别精密吸取对照品液3.0ml，完全转移至25ml容量瓶中，再加水3.0ml；然后加入0.3～0.7％亚硝酸钠溶液1ml，放置6分钟；再加入8～12％硝酸铝1ml，放置5～10分钟；加入9～11％氢氧化钠10ml，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，放置10～20分钟。其中供试品溶液的制备方法为：取越橘提取物粉末0.3～0.8g，精密称定，以少量蒸馏水溶解，加入到预先处理好的聚酰胺柱(内径1.9cm，柱高36cm，上柱量为柱高的一半)，用蒸馏水400～600ml冲洗至流出液无色，再用乙醇400～600ml冲洗至流出液无色，将乙醇洗脱液浓缩，用乙醇定容至250ml容量瓶中。精密吸取4ml，置25ml容量瓶中，加2ml蒸馏水，然后加入0.3～0.7％亚硝酸钠溶液1ml，放置6分钟；再加入8～12％硝酸铝1ml，放置5～10分钟；加入9～11％氢氧化钠10ml，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，放置10～20分钟，即得供试品溶液。(6)金丝桃苷含量测定包括以下步骤：分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定，其特征是：色谱条件为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.09～0.18％磷酸水溶液(12～18∶88～82)；检测波长为320～375nm。理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于2000。其中对照品溶液的制备方法为：精密称取金丝桃苷对照品适量，加50％乙醇制成每1ml含3～6μg的溶液，即得。其中供试品溶液的制备方法为：精密称取越橘提取物180～220mg，置50ml容量瓶中，加50％乙醇溶解并稀释至刻度，经0.45um微孔滤膜过滤，即得。