[发明专利]博伊丁假丝酵母甲酸脱氢酶的原核表达载体及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201010172023.2 | 申请日： | 2010-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN102277370A | 公开（公告）日： | 2011-12-14 |
| 发明（设计）人： | 陈丽梅;张婧;李昆志 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/53;C12N9/02 |
| 代理公司： | 昆明今威专利代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650093 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效表达博伊丁假丝酵母甲酸脱氢酶蛋白的原核表达载体pET28a-FDH。该载体是含有博伊丁假丝酵母甲酸脱氢酶基因(FDH)的原核表达载体。本发明从博伊丁假丝酵母中克隆出FDH基因，用T7启动子控制它在大肠杆菌中的表达，表达的重组蛋白质40％以可溶性形式存在于上清中(占大肠杆菌可溶性总蛋白40％)，60％存在于包涵体中，通过割胶纯化从包涵体中很容易获得高纯度的重组蛋白质，可作为抗原用于FDH特异性抗体的制备。用亲和层析很容易从大肠杆菌可溶性总蛋白中纯化出有活性的重组FDH蛋白质，用于FDH酶制剂的生产及其生化特性分析。 | ||
| 搜索关键词： | 博伊丁假丝 酵母 甲酸 脱氢酶 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
FDH的原核表达载体pET28a‑FDH，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点和FDH基因及一个组氨酸标签。
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