[发明专利]油菜饼抗菌肽有效
申请号: | 201010176000.9 | 申请日: | 2010-05-18 |
公开(公告)号: | CN101849608A | 公开(公告)日: | 2010-10-06 |
发明(设计)人: | 杨志荣;冯甦;赵建;侯若彤;聂远洋;颜亮 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | A23K1/00 | 分类号: | A23K1/00;A23L3/3472 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610065 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明提供了一种新的对饲料中的霉菌有很好抑制作用的抗菌肽。该抗菌肽来源于油菜饼,其抑菌活性较高、分子量小、稳定性强、安全无毒,在饲料防腐试验中显示出比单一化学防霉剂更好的抑菌效果。本发明还提供了油菜饼抗菌肽的分离纯化方法、稳定性测试方法、动物急性毒性试验方法以及提供一种防止饲料中霉菌的应用方法。 | ||
搜索关键词: | 油菜 抗菌 | ||
【主权项】:
一种油菜饼抗菌肽的分离纯化、稳定性和安全性测试方法,包括:(1)培养基制备;(2)抗真菌活性检验;(3)将一定量的油菜饼磨碎,加200mL 0.05mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液,4℃放置12h后,4℃,4000r/min离心30min取上清液;再通过饱和度为60±5%的硫酸铵沉淀、脱盐(透析液选用0.05mol/L的pH 8.0的Tris-HCl缓冲液)、分子筛柱层析(Sephadex G-100,取提取液上样,用0.05mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液洗脱)以及高效液相色谱法对粗蛋白进行纯化,将纯化后的分离液冷冻干燥成粉末,用适当体积的0.05mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液溶解备用;(4)将提取的油菜饼抗菌肽进行活性测定;(5)聚丙烯酰胺凝胶电泳测定油菜饼抗菌肽的分子大小;(6)对提取的油菜饼抗菌肽进行热稳定性、酸碱稳定性分析;(7)扫描电镜观察油菜饼抗菌肽对真菌的抑制作用;(8)选昆明种小白鼠,做油菜饼抗菌肽提取物的动物急性毒性试验;(9)通过抑菌活性试验和饲料防霉实验检验油菜饼抗菌肽提取物对饲料中霉菌的抑制作用。
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