[发明专利]体外扩增人脐带胎盘间充质干细胞的方法有效
| 申请号： | 201010178277.5 | 申请日： | 2010-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN101831403A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 洪敬欣;韩俊领;钱其军;李林芳;刘剑 | 申请（专利权）人： | 协和干细胞基因工程有限公司;上海东方肝胆外科医院 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 天津才智专利商标代理有限公司 12108 | 代理人： | 王晓红 |
| 地址： | 300384 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种体外扩增人脐带胎盘间充质干细胞的方法，采用人脐带胎盘作为细胞来源，利用II型胶原酶消化组织，离心，弃去上清液，用D-Hank’s液洗涤3次后，即获得单细胞悬液，接种于培养板或培养瓶中，24-72小时细胞(P0)贴壁后全量换液，待细胞达到80％-90％融合时传代1次(P1)，然后按最低1400个细胞/cm2的密度将细胞接种至滚瓶中，对比不同培养体系间充质干细胞的生长状态、细胞倍增时间和成集落能力，获得了高效、稳定的扩增培养体系，并利用该最佳扩增体系在滚瓶中大规模扩增间充质干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 体外 扩增 脐带 胎盘 间充质 干细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种体外扩增人脐带胎盘间充质干细胞的方法，包括脐带胎盘的机械切割，胶原酶消化，间充质干细胞的分离培养，间充质干细胞的体外扩增，其特征在于，所述间充质干细胞的体外扩增在滚瓶中进行，所用的培养体系为：所述培养体系，按体积百分比浓度包括如下成份：基础培养基占82-87％，生长因子占2％，FBS占10-15％，L-谷氨酰胺占0.99％，硫酸庆大霉素占0.01％。
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