[发明专利]一种变构酸的制备方法有效

专利信息
申请号: 201010178819.9 申请日: 2010-05-21
公开(公告)号: CN101864467A 公开(公告)日: 2010-10-20
发明(设计)人: 陈小龙;黄振;芮云峰;范永仙;嘉晓勤 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: C12P17/04 分类号: C12P17/04
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 33201 代理人: 黄美娟;王兵
地址: 310014 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明提供一种变构酸的制备方法,将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中,配制成变构霉素溶液,再将脂肪酶溶解于缓冲液B中,配制酶液;将酶液加入到变构霉素溶液中,于25-40℃下反应0.5-5.0h,反应结束,将反应液pH调至4.0,用等体积的萃取溶剂A萃取;取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取,取有机层,用饱和盐水洗涤后再用Na2SO4干燥,真空蒸馏浓缩溶剂,得到变构酸粗品;将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂,取含变构酸的柱层析产品用丙酮重结晶,得到变构酸产品。本发明利用脂肪酶对发酵的变构霉素进行水解,获得变构酸,具有反应条件温和、反应专一、高效等优点。
搜索关键词: 一种 变构酸 制备 方法
【主权项】:
1.一种如式(I)所示的变构酸的制备方法,其特征在于所述方法包括如下步骤:将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中,配制成浓度为5000-50000μg/mL的变构霉素溶液,再将脂肪酶溶解于0.1-0.5M的缓冲液B中,配制成浓度为100-500U/mL的酶液;将酶液加入到变构霉素溶液中,并且变构霉素与脂肪酶活力之比为500-5000μg/U,于25-40℃下反应0.5-5.0h,反应结束,将反应液pH调至4.0,用等体积的萃取溶剂A萃取,分离出萃液层和水层;取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取,取有机层,用饱和盐水洗涤后再用Na2SO4干燥,真空蒸馏浓缩溶剂,得到变构酸粗品;将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂,经硅胶柱进行梯度洗脱,将收集到的洗脱液分别进行薄层层析,取含变构酸的柱层析产品,将得到的含变构酸的柱层析产品合并用丙酮重结晶,得到如式(I)所示的变构酸产品,
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