[发明专利]一种变构酸的制备方法有效
申请号: | 201010178819.9 | 申请日: | 2010-05-21 |
公开(公告)号: | CN101864467A | 公开(公告)日: | 2010-10-20 |
发明(设计)人: | 陈小龙;黄振;芮云峰;范永仙;嘉晓勤 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;王兵 |
地址: | 310014 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供一种变构酸的制备方法,将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中,配制成变构霉素溶液,再将脂肪酶溶解于缓冲液B中,配制酶液;将酶液加入到变构霉素溶液中,于25-40℃下反应0.5-5.0h,反应结束,将反应液pH调至4.0,用等体积的萃取溶剂A萃取;取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取,取有机层,用饱和盐水洗涤后再用Na2SO4干燥,真空蒸馏浓缩溶剂,得到变构酸粗品;将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂,取含变构酸的柱层析产品用丙酮重结晶,得到变构酸产品。本发明利用脂肪酶对发酵的变构霉素进行水解,获得变构酸,具有反应条件温和、反应专一、高效等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 变构酸 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种如式(I)所示的变构酸的制备方法,其特征在于所述方法包括如下步骤:将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中,配制成浓度为5000-50000μg/mL的变构霉素溶液,再将脂肪酶溶解于0.1-0.5M的缓冲液B中,配制成浓度为100-500U/mL的酶液;将酶液加入到变构霉素溶液中,并且变构霉素与脂肪酶活力之比为500-5000μg/U,于25-40℃下反应0.5-5.0h,反应结束,将反应液pH调至4.0,用等体积的萃取溶剂A萃取,分离出萃液层和水层;取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取,取有机层,用饱和盐水洗涤后再用Na2SO4干燥,真空蒸馏浓缩溶剂,得到变构酸粗品;将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂,经硅胶柱进行梯度洗脱,将收集到的洗脱液分别进行薄层层析,取含变构酸的柱层析产品,将得到的含变构酸的柱层析产品合并用丙酮重结晶,得到如式(I)所示的变构酸产品,![]()
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