[发明专利]蛋白酶激活受体激动剂的制备方法及其用途

摘要

本发明提供蛋白酶激活受体激动剂的制备方法及其用途，即两栖类三叶因子Bm-TFF2作为人蛋白酶激活受体1、蛋白酶激活受体2和蛋白酶激活受体4的新型激动剂，人三叶因子2作为蛋白酶激活受体4的新型激动剂，以及它们的衍生结构作为蛋白酶激活受体1和4的新型激动剂在刺激血小板活化，诱导细胞迁移及促进创伤修复中的应用。提供检测人胃癌组织中蛋白酶激活受体4表达，检测三叶因子2和蛋白酶激活受体4在肠癌组织中的表达用于临床监测肿瘤病程的发展。可用于生物医学试剂制备、制药和临床检验等领域。证明了三叶因子蛋白和蛋白酶激活受体之间存在直接的相互作用，为深入了解这两种蛋白的生物学功能及其机制提供了有益的帮助。有益于临床监测肿瘤病程的发展，为临床诊断和治疗提供帮助。

主权项

一种蛋白酶激活受体激动剂的制备方法，其特征在于包括：1)该激动剂是两栖类物种大蹼铃蟾的三叶因子Bm-TFF2、人三叶因子2；2)利用PCR技术获取所需的Bm-TFF2或人三叶因子2基因全序列并将它们分别插入原核表达载体pET-32a(+)中；3)在大肠杆菌原核表达系统中高效表达了Bm-TFF2以及人三叶因子2；4)通过对表达菌株裂解液亲和层析得到可溶性融合蛋白TRX-Bm-TFF2以及人三叶因子2；5)融合蛋白经第X因子蛋白酶酶切后再经镍亲和柱纯化，得到纯化的Bm-TFF2以及人三叶因子2。