[发明专利]一种以重组毕赤酵母高效发酵制备木聚糖酶的工艺无效

专利信息
申请号: 201010184296.9 申请日: 2010-05-27
公开(公告)号: CN101838638A 公开(公告)日: 2010-09-22
发明(设计)人: 林格;郝名慧;杨海龙;姜小伟 申请(专利权)人: 温州海螺挑战生物工程有限公司
主分类号: C12N9/42 分类号: C12N9/42;C12R1/84
代理公司: 温州瓯越专利代理有限公司 33211 代理人: 李友福
地址: 325011 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明涉及一种以重组毕赤酵母发酵制备木聚糖酶的改进工艺,属发酵工程领域。本发明中培养基采用低盐配方,各组分的质量百分比为,碳源3~6%、氮源2~3%、硫酸镁0.5~1.2%、硫酸钾0.5~1.0%,磷酸二氢钾0.2~0.5%。有效地改善了重组毕赤酵母的生长状况,节约了培养原料。此外,本发明通过调整诱导表达阶段甲醇的补加工艺,使甲醇的加入量与菌体的生长量相匹配,减少了甲醇的加入量,实现了低成本、高效发酵制备木聚糖酶。
搜索关键词: 一种 重组 酵母 高效 发酵 制备 聚糖 工艺
【主权项】:
一种以重组毕赤酵母高效发酵制备木聚糖酶的工艺,包括菌体分批发酵、补料发酵及外源基因的诱导表达阶段,其特征在于,在所说的分批发酵和补料发酵阶段中的培养基采用低盐配方,各组分的质量百分比为碳源3~6%、氮源1~3%、硫酸镁0.8~1.2%、硫酸钾0.5~1.0%,磷酸二氢钾0.2~0.5%;发酵温度为27~30℃,发酵pH为4.5~5.5,发酵时间为18~30h;所述外源基因的诱导表达阶段中,利用甲醇进行诱导,总诱导时间为110~140h,所说的甲醇诱导分为四个阶段:第一阶段为发酵时间的24h至60h,甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入0.5~1.0毫升;第二阶段为发酵时间的60h至96h,甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入1.0~1.5毫升;第三阶段为发酵时间的96h至120h,甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入1.5~3.0毫升;第四发酵时间的120h至170h,甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入3.0~4.5毫升。
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