[发明专利]用原核表达系统制备铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF的方法无效
| 申请号： | 201010184859.4 | 申请日： | 2010-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN101831440A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 胡成进;王燕 | 申请（专利权）人： | 胡成进 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12N15/70;C07K14/21 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 张贵宾 |
| 地址： | 250031 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明属于医学研究领域，特别涉及一种用原核表达系统制备铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF的方法。该方法利用原核表达系统构建并表达OprF蛋白，为今后采用杂交瘤技术获得OprF特异性单克隆抗体或免疫动物获得多价特异性抗血清，通过胶体金免疫层析技术达到对铜绿假单胞菌的快速筛查检测奠定研究基础。 | ||
| 搜索关键词： | 用原核 表达 系统 制备 铜绿 假单胞菌外 膜蛋白 oprf 方法 | ||
【主权项】：
一种用原核表达系统制备铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF的方法，其特征在于：主要包括如下步骤：(1)从铜绿假单胞菌中提取基因组DNA，以此为目的基因通过PRC扩增OprF羧基端，并将其克隆至原核表达载体pET28b中，构建重组表达载体pET28b-OprF；(2)重组质粒经酶切和序列测定后，转化E.coli BL21，IPTG诱导表达，进行SDS-PAGE检测；(3)经Ni-NTA亲和层析柱纯化后得到元和表达的OprF蛋白。
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