[发明专利]一种麝香抗炎活性的检测方法

摘要

本发明公开了一种麝香抗炎活性的检测方法，方法包括待测品溶液的制备和对照品的制备，根据待测品对环氧酶Ⅱ(COX-2)产生的抑制作用，通过所建立的麝香抗炎活性效价测定方法，评价麝香质量，即，采用酶免疫测定法，测定麝香作用前后COX-2催化的由花生四烯酸(AA)生成前列腺素(PGs)量的变化，从而给出麝香对COX-2的抑制作用量效关系。根据测定结果，按照“二剂量”法进行可靠性检验及效价计算，获得麝香的抗炎活性效价。本发明首次建立了麝香的抗炎活性的生物测定方法，具有在检测过程中所受干扰因素少、操作简单、节约经费并可独立特异性表征麝香抗炎活性的优点。

主权项

一种麝香抗炎活性的检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)取麝香提取、提取液配制成不同浓度的溶液为待测品A；(2)配制系列浓度的前列腺素(PG)标准品溶液B；(3)配制系列浓度的的阿司匹林溶液作为阳性对照品C；(4)分别配制背景组，环氧酶II(COX-2)100％初始活性组，阳性对照组及麝香供试品组4种反应体系组；(5)进行环氧酶II(COX-2)反应步骤：即取上述步骤(4)所制得的四组反应液，混匀，37℃水浴孵育10～20min；孵育后的四组反应液中均加入1份花生四烯酸，混匀，37℃水浴孵育2min；(6)取步骤(5)中经COX-2反应的四组反应液，加入1M HCl 50μl，停止水浴，每组均加入与反应体系组等体积的饱和SnCl2溶液，混匀，室温放置5min；(7)将步骤(6)所得的四组反应液分别稀释；(8)将步骤(7)获得的一系列前列腺素供试品，采用试剂盒，通过酶免疫法，测定各组反应液吸收度值，并以PG标准品溶液B得到的吸收度标准曲线计算各组反应液中前列腺素的含量，供试品D、E、F、G的前列腺素含量分别为CD，CE，CF，CG；(9)根据供试品D、E、F、G的前列腺素含量分别计算阳性对照组抑制率和麝香供试品组抑制率；(10)根据(9)步得到的阳性对照组抑制率和麝香供试品组抑制率，采用“二剂量”法对麝香供试品组抑制率进行可靠性检验，从而确定麝香抗炎活性效价。