[发明专利]一种寡核苷酸“直接缩合法”试剂及其用途

摘要

本发明涉及一种寡核苷酸“直接缩合法”试剂的结构及其用途，该结构包含一个亚磷酰胺基团及连接臂的核苷琥珀酸酯，通式为：式中R为H或OH，B为碱基，n为2、3、6或12。该试剂的制备方法如下：核苷糖环的3’位羟基与琥珀酸的一个羧基缩合形成酯键，琥珀酸的第二个羧基与氨基醇连接臂的氨基以酰胺键进行连接，连接臂上羟基再连接2-氰乙氧基-N，N-二异丙基亚磷酰胺得到。该试剂可分别以亚磷酸酯键或亚磷酰胺键与固相载体表面的羟基或氨基共价结合，之后再氧化或硫化成稳定的磷酸酯或磷酰胺。本发明提供的“直接缩合法”试剂在固相载体表面羟基或氨基上高效快速连接核苷的制备过程可应用于寡核苷酸的合成循环。

主权项

1.提供一种寡核苷酸“直接缩合法”合成用试剂，该试剂包含一个亚磷酰胺基团及连接臂的核苷琥珀酸酯的结构，通式为式中R为H时，结构为β-D-呋喃脱氧核苷，R为OH时，结构为β-D-呋喃核苷；B为碱基，选自腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)、胸腺嘧啶(T)或尿嘧啶(U)；n取值为2、3、6或12。