[发明专利]一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用无效
申请号: | 201010187107.3 | 申请日: | 2010-05-25 |
公开(公告)号: | CN101838634A | 公开(公告)日: | 2010-09-22 |
发明(设计)人: | 张先恩;周亚凤;王晓英;张治平;王殿冰;危宏平;崔宗强 | 申请(专利权)人: | 中国科学院武汉病毒研究所 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20;C12N15/57;C14C5/00 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430071*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用,一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F),CCTCC NO:M2010057。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因;第二是设计二对诱变引物,通过重叠PCR法将两个突变位点依次引入脂肪酶Lip A基因;第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(R33W/L140F);第四是在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白;第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明方法易行,成本低廉,高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 枯草 芽孢 杆菌 脂肪酶 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,其特征在于:该酶在大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F)的表达,CCTCC NO:M2010057。
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