[发明专利]高通量单核苷酸多态性检测方法

摘要

一种高通量单核苷酸多态性检测方法，检测步骤为：磁性纳米颗粒的修饰；引物的设计；制备磁珠阵列；扩增样本的全基因组扩增产物或者多重PCR产物；延伸反应；反应完成后，经洗涤，去除微流体反应池盖片和磁体，应用生物芯片扫描仪获得所检测样本的生物信息。本发明克服了目前单核苷酸多态性检测方法的许多不足，具有操作简单、快速、高通量、高灵敏度等优点，有较高的应用价值。

主权项

一种高通量单核苷酸多态性检测方法，其特征在于检测步骤为：a.磁性纳米颗粒的修饰：对无荧光背景的磁性颗粒表面进行功能化修饰；b.引物的设计：选取待检测的重要功能SNP位点或突变位点，根据上述位点碱基序列设计单碱基延伸引物，引物的3’端与SNP位点的上游一个碱基互补，5’端经过功能化修饰共价连接到磁珠表面，得到延伸引物-磁珠复合物；c.制备磁珠阵列：选取洁净的载玻片，其一面粘附有杂交反应池，载玻片另一面年附有永磁体，将延伸引物-磁珠复合物点样于杂交反应池之内，复合物通过永磁体磁场固定于玻片表面；d.扩增样本的全基因组扩增产物或者多重PCR产物；e.延伸反应：延伸反应的体系中包括磁珠延伸引物，扩增产物模板DNA，与待检测相关SNP位点相对应的荧光标记的ddNTP，Mg2+、缓冲液、DNA聚合酶，通过退火使得靶序列和延伸引物结合，在DNA聚合酶的作用下，与待检测位点相对应的荧光标记的ddNTP延伸在引物3’端；f.反应完成后，经洗涤，去除微流体反应池盖片和磁体，应用生物芯片扫描仪获得所检测样本的生物信息。