[发明专利]一种多年生黑麦草的遗传转化方法无效
申请号: | 201010193511.1 | 申请日: | 2010-06-07 |
公开(公告)号: | CN102268450A | 公开(公告)日: | 2011-12-07 |
发明(设计)人: | 马欣荣;杨宏;毛萍;乔定君 | 申请(专利权)人: | 中国科学院成都生物研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 成都赛恩斯知识产权代理事务所(普通合伙) 51212 | 代理人: | 肖国华 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导的黑麦草(Lolium L.)遗传转化方法。包括愈伤组织诱导和继代培养、愈伤组织切碎、根癌农杆菌的培养、根癌农杆菌侵染愈伤组织、根癌农杆菌与愈伤组织共培养、恢复除菌培养、选择培养、分化再生培养、植株继代选择培养,愈伤组织诱导所用的材料是黑麦草的成熟种子胚;根癌农杆菌浸染愈伤组织时的培养基、根癌农杆菌与愈伤组织共培养的培养基以及浸染后的恢复培养基中均添加硫辛酸;根癌农杆菌浸染愈伤组织过程,是在愈伤组织切碎后立即加入菌液混合均匀;根癌农杆菌是携含目的基因、选择抗性基因和报告基因的植物表达载体质粒。本发明方法能有效抑制共培养后愈伤组织的褐化,操作简单易行,能获得稳定的转化效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 多年生 麦草 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种多年生黑麦草的遗传转化方法,包括愈伤组织诱导和继代培养、愈伤组织切碎、根癌农杆菌的培养、根癌农杆菌侵染愈伤组织、根癌农杆菌与愈伤组织共培养、恢复除菌培养、选择培养、分化再生培养、植株继代选择培养步骤,其特征是:愈伤组织诱导所用的材料是黑麦草的成熟种子胚;根癌农杆菌浸染愈伤组织时的培养基、根癌农杆菌与愈伤组织共培养的培养基以及浸染后的恢复培养基中均添加硫辛酸;根癌农杆菌浸染愈伤组织过程,是在愈伤组织切碎后立即加入菌液混合均匀;根癌农杆菌是携含目的基因、选择抗性基因和报告基因的植物表达载体质粒。
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