[发明专利]猕猴属灵长类动物精液超低温冷冻保存方法无效

专利信息
申请号: 201010198716.9 申请日: 2010-06-12
公开(公告)号: CN101843238A 公开(公告)日: 2010-09-29
发明(设计)人: 司维;牛昱宇;纪少珲;王宏;季维智 申请(专利权)人: 昆明亚灵生物科技有限公司
主分类号: A01N1/02 分类号: A01N1/02
代理公司: 昆明科阳知识产权代理事务所 53111 代理人: 孙山明
地址: 650500 云南*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 猕猴属灵长类动物精液超低温冷冻保存方法,属于动物繁殖方法。本发明将Tris、TES、乳糖、葡萄糖、棉籽糖、青霉素G钠盐、硫酸链霉素等溶于水,离心取上清液制成精液稀释液,加甘油配成防冻液,再用稀释液稀释精液降温至4℃,与等体积的预冷至4℃的防冻液混合,分装冷冻麦管中并于液氮蒸汽降温后放入-196℃液氮中保存。使用时,解冻复苏精子。本发明可以提高猕猴属灵长类动物冷冻精子复苏运动度、存活时间、质膜和顶体完整率及受精率。
搜索关键词: 猕猴 灵长类 动物 精液 超低温 冷冻 保存 方法
【主权项】:
猕猴属灵长类动物精液超低温冷冻保存方法,包括如下步骤:(1)取0.2gTr i s、1.2g TES、2g乳糖、2g葡萄糖、0.2g棉籽糖、10000IU青霉素G钠盐、5mg硫酸链霉素依次溶于60mL Mil li-Q超纯水中,加入20mL鸡蛋卵黄,混合均匀后加水定容至100mL;(2)将溶液以7000g离心1小时,收集上清液制成稀释液;(3)取45mL稀释液加入5mL的甘油制成防冻液,预冷至4℃;(4)在室温下,将精液与稀释液按1∶9的体积比在试管中混合、封口,以室温水浴,再放入4℃冰箱中缓慢降温平衡2小时;(5)向试管中加入等体积的防冻液,混合均匀后分装入麦管中于液氮中保存;混合均匀后分装入0.25mL麦管中于液氮中保存;(6)复苏时将冷冻麦管由液氮中迅速转移至37℃的水浴中解冻2分钟。
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