[发明专利]利用ATP生物发光进行水环境急性毒性检测的方法

摘要

本发明公开了一种利用ATP生物发光进行水环境急性毒性检测的方法，向反应试管中依次先后加入ATP反应试剂、虫荧光素酶、ATP标准品、待检测水体，置于ATP荧光检测仪中检测发光强度，检测响应时间为30s，以此为实验组；将标准品替换为蒸馏水，以此为对照组；实验组和对照组均重复操作检测三次；通过计算相对发光率K判断水体的毒性。本发明方法具有测试效果稳定、灵敏的特点，测试时间最多不超过3分钟，可达到发光细菌测试的效果，对有机有毒物质的响应比发光细菌还要灵敏。本发明采用的是便携式ATP手持仪，使用直流电源，因此便于携带适合现场测试。

主权项

一种利用ATP生物发光进行水环境急性毒性检测的方法，其特征在于向反应试管中依次先后加入ATP反应试剂、虫荧光素酶、ATP标准品、待检测水体，置于ATP荧光检测仪中检测发光强度，检测响应时间为30s，以此为实验组；向反应试管中依次先后加入与实验组相同的检测试剂，以蒸馏水为无毒的参照物，置于ATP荧光检测仪中检测发光强度，检测响应时间为30s，以此为对照组；实验组和对照组均重复操作检测三次；所述的ATP反应试剂包含如下浓度的组分：虫荧光素10～100mg/L、Mg2+5～100mmol/L、EDTA 0.5～50mmol/L、Tris-HCl缓冲液10～100mmol/L；所述的ATP标准品浓度为10-10～10-3mol/L；按下式计算相对发光率K：相对发光率K＝实验组三次试验发光强度之和/对照组三次试验发光强度之和；当K＞70％，则毒性级别为低毒；当50％＜K≤70％，则毒性级别为中毒；当30％＜K≤50％，则毒性级别为重毒；当0％＜K≤30％，则毒性级别为高毒；当K＝0，则毒性级别为剧毒。