[发明专利]一种猪瘟活疫苗效力检验方法有效
申请号: | 201010210087.7 | 申请日: | 2010-06-22 |
公开(公告)号: | CN101846683A | 公开(公告)日: | 2010-09-29 |
发明(设计)人: | 张许科;孙进忠;乔荣岑 | 申请(专利权)人: | 洛阳普莱柯生物工程有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N21/64;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人: | 韩登营 |
地址: | 471000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明属于兽药生物新医药技术领域,具体涉及猪瘟活疫苗的效力检验方法。通过用间接免疫荧光(IFA)方法检测活疫苗的病毒含量来评价活疫苗的效力。该方法检测时间短,并且操作简单、成本低、得到的结果准确,可重复性好,具有很好的应用价值和广阔的市场前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 猪瘟 疫苗 效力 检验 方法 | ||
【主权项】:
一种猪瘟活疫苗效力检验方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)准备传代细胞将长满单层的细胞,用EDTA-胰酶消化分散,得到传代细胞悬液;(2)猪瘟活疫苗在传代细胞中的病毒含量测定用细胞维持液将冻干猪瘟活疫苗回溶并稀释,将活疫苗稀释液与步骤(1)中细胞悬液加入细胞培养板中,置于培养箱中培养,同时设立不接毒正常细胞对照;(3)间接免疫荧光(IFA)方法检测步骤(2)所得细胞中病毒含量①将细胞培养板从培养箱中取出,弃去培养板孔内液体,用PBS洗涤;②加入丙酮水溶液固定;③弃去丙酮水溶液,用PBS洗涤;④加入PBS稀释的猪瘟阳性血清(一抗);⑤弃去一抗,PBS洗涤;⑥加入PBS稀释的FITC标记兔抗猪IgG(二抗);⑦弃去二抗,用PBS洗涤,最后加入PBS保存;⑧置于荧光显微镜下观察荧光情况,判定猪瘟活疫苗效力。
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