[发明专利]从莜麦中提取α-淀粉酶抑制剂的方法

摘要

本发明公开了一种从莜麦中提取α-淀粉酶抑制剂的方法，本方法先将莜麦种子去壳粉碎，经丙酮脱脂，然后硫酸铵沉淀、离子交换层析及凝胶层析最后获得电泳纯的α-淀粉酶抑制剂，抑制比活为26.43U/mg。本发明提取α-淀粉酶抑制剂的材料来源于莜麦，提纯方法简便，产品纯度高，抑制活性强，提取的α-淀粉酶抑制剂可用于制备减肥和治疗糖尿病的药物。

主权项

一种从莜麦中提取α‑淀粉酶抑制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将莜麦种子磨碎，按每100g莜麦300‑600mL丙酮的量，将莜麦粉加入丙酮中，室温放置10小时以上，用真空减压泵抽干成丙酮粉；(2)配制含100mM NaCl的20mM Tris‑HCl pH8.0的缓冲液，用每100ml缓冲液溶解10‑20g丙酮粉，在高速离心机上离心30min以上，保留上清液；(3)在上清液中加入硫酸铵，收集30％‑80％硫酸铵沉淀；(4)悬浮沉淀，用20mM Tris‑HCl pH8.0缓冲液透析除盐，得到蛋白溶液；(5)将蛋白溶液，在高速离心机上离心30min以上，取上清液上样于经20mM Tris‑HClpH8.0缓冲液平衡的阴离子型柱上，收集穿透蛋白溶液；(6)将穿透蛋白溶液上样到经20mM Tris‑HCl pH8.0缓冲液平衡的阳离子型柱上，进行NaCl浓度梯度洗脱，收集50mM NaCl盐浓度下的洗脱蛋白溶液；(7)将洗脱蛋白溶液上样到经20mM Tris‑HCl100mM NaCl pH8.0缓冲液平衡的凝胶层析柱上，用20mM Tris‑HCl100mM NaCl pH8.0缓冲液洗脱，收集活性洗脱峰，脱盐，冷冻干燥，获得冻干粉。