[发明专利]一种菊糖果糖转移酶的克隆及其高效表达无效
申请号: | 201010231286.6 | 申请日: | 2010-07-15 |
公开(公告)号: | CN101906405A | 公开(公告)日: | 2010-12-08 |
发明(设计)人: | 周榴明;江波;沐万孟;赵萌;张涛;缪铭;杭华 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214122 江苏省无锡市蠡湖大道*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种菊糖果糖转移酶的克隆及其高效表达,属于生物工程技术领域。本发明公开了一种菊糖果糖转移酶(IFTase)基因、其高表达重组大肠杆菌BL21-IFT的构建及诱导高效表达的方法。以产IFTase的金黄节杆菌(Arthrobacter aurescens)SK 8.001的DNA为模板,经PCR扩增获得编码IFTase的基因ift。采用特定核苷酸序列的引物进行扩增,获得重组DNA片段,经鉴定、酶切、连接,转化入宿主细胞,构建成IFTase高表达重组大肠杆菌BL21-IFT。将此阳性克隆子在含氨苄青霉素的LB培养基中活化,再接种于新鲜的含氨苄青霉素的LB液体培养基中,培养至OD600为0.4-1.2时,加入诱导剂、表面活性剂诱导表达,IFTase得到了高效表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 糖果 转移酶 克隆 及其 高效 表达 | ||
【主权项】:
一种来源于金黄节杆菌(Arthrobacter aurescens)SK 8.001的菊糖果糖转移酶,其基因核苷酸序列为SEQ ID NO:1。
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