[发明专利]罗非鱼耐寒新品种的选育方法

摘要

一种罗非鱼耐寒新品种的选育方法，采用群体继代选育、家系选育及专门化品系选育等技术，以自然筛选和人工低温胁迫选育为手段，对不同地理种群的罗非鱼进行耐寒能力的测定和筛选，选育出了专门化品系耐寒型罗非鱼，建立了罗非鱼耐寒新品种的选育方法。该技术具有针对性强，效果显著等特点，耐寒性罗非鱼苗种的越冬成活率为80％以上，低温死亡率比普通罗非鱼降低了15％以上。为鱼类耐寒品种培育开辟了新的技术途径，适宜在鱼类选育上推广应用，对养殖鱼类安全越冬具有重要的意义和应用价值。

主权项

一种罗非鱼耐寒新品种的选育方法，其特征在于它的技术内容包括(1)罗非鱼耐寒材料的筛选；(2)罗非鱼耐寒品种基础群和核心群的建立；(3)罗非鱼耐寒家系的建立、评估及筛选；(4)罗非鱼耐寒型专门化品系的选育；(1)罗非鱼耐寒材料的筛选：采用自然选择和人工低温胁迫方法获得罗非鱼耐寒材料的收集采用自然选择的途径获得：在每次罗非鱼主产区发生大的寒灾后，收集存活下来的不同品种或品系罗非鱼作为育种材料，并采用荧光法进行标记，按照罗非鱼亲鱼的养殖技术规范进行培育，性成熟后扩繁P0代群体作为耐寒品种的筛选材料；罗非鱼耐寒育种材料的品种筛选采用人工低温胁迫的比较方法：利用温控型水族箱对寒灾后收集的不同品种或品系的P0代罗非鱼群体进行人工低温胁迫试验，人工低温胁迫水温降温变化：水温22℃保持24小时，经48小时缓慢降至16℃，再经48小时降到11℃，此后每天降1℃直至每个品种个体全部死亡为止，连续降温5～8天；观察并记录鱼的活动情况和死亡数，测量死鱼的体长和体重；计算每个品种或品系的平均CDH和半数致死低温；通过比较它们之间耐寒力，筛选确定出罗非鱼耐寒育种材料的品种或品系；(2)罗非鱼耐寒品种基础群和核心群的建立罗非鱼耐寒品种基础群的建立：以筛选出罗非鱼耐寒材料的P0代扩繁群体为对象，利用温控型水族箱进行低温胁迫选育；人工低温胁迫选育的降温要求：水温22℃保持24小时，经48小时缓慢降至16℃，再经48小时降到11℃，此后每天降1℃直至每个品种累计死亡率达到50～60％时，停止降温，采用1℃/h缓慢回温方式，恢复到常温25℃；在水族箱继续饲养一周后，选留存活个体作为罗非鱼耐寒品种基础群，其耐寒力指标高于群体的均值以上；筛选条件与罗非鱼耐寒育种材料的品种筛选要求相同；罗非鱼耐寒品种核心群的建立：从上述选留的罗非鱼耐寒品种基础群作为选育对象，人工低温胁迫选育的降温要求：亲本暂养12小时，12小时降温至22℃，保持24小时，48小时之后降到16℃，48小时之后降温至11℃，24小时之后降温至10℃，24小时之后降到9℃，以每小时0.4℃回温至室温25℃；低温选育雌雄鱼分开进行；筛选条件与罗非鱼耐寒育种材料筛选的要求相同；耐寒能力以罗非鱼在低温昏迷先后顺序为标准，建立不耐寒组、中间组，耐寒组、极耐寒组等核心群4个；(3)罗非鱼耐寒家系的建立、评估及筛选选育出的亲本经回温恢复后，每个个体采用注射荧光颜料标记法标记，做好荧光标记后放至水池，相同耐寒能力的家系进行配对，雌雄比例为3∶1；每个家系放置于一个网箱；根据亲鱼培育规程进行培育；罗非鱼不耐寒家系、中间组家系、耐寒家系和不耐寒家系配对50对以上；家系亲本配对后每隔1个星期对雌鱼口腔进行检查；将雌鱼口腔受精卵拿至孵化车间进行孵化，孵化器呈微流水状态，受精卵孵化出膜后，在孵化器中培育至0.8～1.0cm之后，将其转入网箱进行养殖；饲养一个月之后，长至7.0g左右，此时将鱼苗再次进行分箱养殖；对配对所繁育的家系后代进行耐寒能力评价，评估方法与罗非鱼耐寒育种材料的品种筛选方法相同；评估指数：开始死亡温度、最低死亡温度、半数死亡温度、CDH值、家系与其父母本的耐寒力一致性；每世代选留3代没有亲缘关系的耐寒力优秀的家系12个；(4)罗非鱼耐寒型专门化品系的选育每世代选留耐寒力优秀的家系进行家系内筛选选育，选育方法与罗非鱼耐寒品种基础群和核心群的建立方法相同；选留出耐寒能力最强的个体组成罗非鱼耐寒型专门化品系，每个家系选留雌雄数目为50尾以上。