[发明专利]一种简化的脐带间充质干细胞的规模化制备方法

摘要

本发明涉及一种脐带间充质干细胞的规模化制备方法。在该方法中，脐带剪切块虽较大，但仍能大量的缩短原代培养时间。培养基含bFGF及FBS，既促进了间充质干细胞贴壁生长，又不影响干细胞的分化能力，至8-9天细胞即达80％左右融合，细胞生长快，传代时间短。

主权项

一种脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)新鲜脐带，用PBS缓冲液冲洗；2)剪取6 8cm长脐带，将脐带剪成2cm长的小段，用PBS缓冲液反复冲洗；3)将脐带组织块剪碎成2 3mm3小块；4)将剪碎组织加入L DMEM培养基洗涤，在650g条件下离心5分钟，弃上清；5)将组织块和培养基按体积比2.5 3∶1比例加入培养基，混匀组织块，接种至细胞培养皿中，置培养箱培养；所述的培养基为含1 10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子及体积百分比10％ 15％胎牛血清的L DMEM培养基；6)24小时后补加步骤5所述的培养基；7)每3天换一次培养基，第6天后换含体积比10％胎牛血清的L DMEM培养基，至8 9天细胞达80％左右融合时传代；传代培养基为含体积比10％胎牛血清的L DMEM培养基；8)以后每3天传代一次。