[发明专利]非传播抗猪瘟和乙脑基因工程双价标记减毒活疫苗及应用

摘要

本发明提供了一种非传播抗猪瘟和乙脑基因工程双价标记减毒活疫苗及其应用。通过基于猪瘟病毒(CSFV)石门株感染性cDNA克隆反向遗传操作，构建CSFV E2基因缺失的突变体感染性cDNA克隆，在其开放阅读框的5′端插入乙型脑炎病毒(JEV)囊膜糖蛋白E的主要保护性抗原区编码序列，构建了E2基因缺失的CSFV嵌合突变体；该E2缺失嵌合突变体能在表达CSFVE2p7的反式互补细胞系中拯救出抗猪瘟和乙脑的双价疫苗种毒并进行增殖。该疫苗接种猪体能够诱导机体产生针对CSFV和JEV的特异性免疫应答，而其不能在猪体内形成感染性病毒颗粒和在猪群中传播，疫苗接种猪不产生E2抗体可用于区分CSFV野毒感染猪，是一种安全、高效的非传播双价标记疫苗。

主权项

一种非传播抗猪瘟和乙脑基因工程双价标记减毒活疫苗，其是通过将CSFV全长E2基因或其部分缺失，构建得到非传播CSFV E2缺失突变体；将FMDV的2A蛋白编码序列、泛素蛋白编码序列和JEV E蛋白抗原区编码序列融合得到JEV E蛋白抗原区编码基因与2AUbi的融合序列，并将其插入到CSFV E2缺失突变体开放阅读框的5′端，构建得到非传播抗猪瘟和乙脑基因工程双价标记减毒活疫苗。