[发明专利]一种表达弹性蛋白酶2B的基因工程菌、其构建方法及应用无效
| 申请号： | 201010258787.3 | 申请日： | 2010-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN101974555A | 公开（公告）日： | 2011-02-16 |
| 发明（设计）人： | 黄昆仑;许文涛;罗云波;田洪涛;王海峰;谷欣晰;商颖 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12N15/57;C12N9/66;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;王加岭 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种高效表达重组弹性蛋白酶2B的基因工程菌，其是通过反转录克隆了人肾脏组织中的弹性蛋白酶2B(elastase 2B，ELA2B)基因，构建原核重组表达质粒pET30a/ELA2B，转入到大肠杆菌中，从中筛选出高效分泌表达的菌株。该表达系统所表达的外源蛋白的N端具有His蛋白标签，通过Ni柱洗脱的方法进行纯化，极大地简化了重组蛋白的后续纯化工作，获得的重组蛋白纯度高达90％以上，且纯化效率高、成本低，适合目的蛋白的大规模制备。并且用该基因工程菌株发酵的重组弹性蛋白酶酶活可达408U/mL，比铜绿假单胞菌发酵产物高10倍。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 弹性 蛋白酶 基因工程 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
含有ELA2B基因的表达载体，所述ELA2B基因具有Seq ID No：1所示的核苷酸序列。
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