[发明专利]用于心肌梗死动物中自体脂肪干细胞移植模型构建方法

摘要

一种用于心肌梗死动物中自体脂肪干细胞移植模型构建方法，包括配置麻醉复合溶液步骤、分别从大鼠腹股沟及肩胛骨提取大鼠自体脂肪步骤和大鼠心肌梗死模型的建立步骤。其优点如下：1、提取大鼠自体脂肪组织，根本上解决同种异体器官移植中免疫排斥问题；2、具有操作简单，大鼠存活率较高，心梗成功率高，效果可靠等优点，可作为小动物自体脂肪干细胞移植治疗心脏缺血性疾病的研究模型，适用于细胞移植和再生医学领域。本发明首次成功建立了大鼠自体脂肪干细胞治疗心肌梗死动物模型，可进一步用于脂肪干细胞在大鼠心肌梗死模型方面的研究，甚至对各相关领域研究均能起到积极影响。对人自体干细胞移植治疗心肌梗死疾病的临床开展具有一定指导意义。

主权项

一种用于心肌梗死动物中自体脂肪干细胞移植模型构建方法，其特征在于按下述步骤进行：步骤一：2%戊巴比妥钠、10%水合氯醛、阿托品按3﹕2﹕1体积比例混合配置成麻醉复合溶液；步骤二：分别从大鼠腹股沟及肩胛骨提取大鼠自体脂肪，其具体步骤如下：将上述麻醉复合液进行腹腔注射，腹股沟组大鼠以第二乳头为标志向下至大鼠膝关节备皮，固定于大鼠手术板，75%酒精消毒备皮区域后移至超净台紫外线照射30分钟，遮蔽双眼，医用碘伏消毒手术区域，沿腹股沟中点行X型开口，眼科镊及眼科剪配合提取脂肪，操作完成后缝合皮肤；肩胛骨组以第二乳头为标志向头部方向备皮至颈部，采用T型切口提取脂肪，眼科镊及眼科剪配合提取脂肪，操作完成后缝合皮肤；术后腹腔注射40U青霉素预防感染；步骤三：大鼠心肌梗死模型的建立：3周后，运用上述复合麻醉剂腹腔注射麻醉后连接标准导联心电图检测，胸部及颈部备皮75%酒精常规消毒铺巾，颈部正中横切口，行气管切开术并插管，缝合线固定后连接小动物呼吸机，以第二乳头为标志纵行切开皮肤，钝性分离各层组织直至第3肋下缘，小动物扩胸器撑开3、4肋间肌，充分暴露心脏，剪开心包，于肺动脉圆锥和左心耳之间，以左冠状动脉主干为标志，于左心耳根部下方2‑3mm处进针，深度为0.5mm左右，6/0缝合针穿过心肌表层，肺动脉圆锥旁出针，小心结扎左冠状动脉前降支LAD；逐层缝合，术毕腹腔注射40U青霉素预防感染。