[发明专利]促性腺激素释放激素脂质体的制备方法

摘要

本发明涉及促性腺激素释放激素脂质体的制备方法。该方法的具体操作步骤是：将磷脂酰胆碱和胆固醇按照3∶1(w/w)，加入6ml混合有机溶剂(氯仿∶甲醇1∶1，V/V)溶解或6ml无水乙醇溶解，在氮气流下加入促性腺激素释放激素(GnRH)溶液，在旋转蒸发仪上旋转预热30min，然后在水浴式超声仪中进行低温超声分散后，将得到的脂质体悬液进行滤菌处理，即可制得促性腺激素释放激素(GnRH)脂质体。本发明制得的促性腺激素释放激素脂质体可作为哺乳动物免疫去势的药物制剂，用于各种哺乳动物的免疫去势。本发明制剂使用方便，效果显著，安全可靠，稳定性好，易于保存。

主权项

促性腺激素释放激素脂质体的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：(1)将质量比为3∶1的磷脂酰胆碱75mg、胆固醇25mg放入无菌旋转蒸发瓶中，加入6ml混合有机溶剂溶解或6ml无水乙醇溶解，形成磷脂酰胆碱、胆固醇有机溶液；(2)将盛有磷脂酰胆碱、胆固醇有机溶液的旋转蒸发瓶置于60℃水浴中，在旋转蒸发器上旋转预热20分钟后；启动旋转蒸发仪，80℃，旋转蒸发时间为2小时，除去有机溶剂，直至脂质膜均匀的沉积在旋转蒸发瓶壁上；继续负压抽吸20分钟后关闭旋转蒸发器，得磷脂酰胆碱、胆固醇脂质膜；(3)将氮气通入含干燥的磷脂酰胆碱、胆固醇脂质膜的旋转蒸发瓶中，并将其放入真空干燥器，室温真空30分钟，得干燥的磷脂酰胆碱、胆固醇脂质膜；(4)取10mg促性腺激素释放激素溶于10ml浓度为0.01mol/l的磷酸盐缓冲液中，得促性腺激素释放激素溶液；(5)将含有干燥的磷脂酰胆碱、胆固醇脂质膜的旋转蒸发瓶在氮气流下加入促性腺激素释放激素溶液，将旋转蒸发瓶置于60℃水浴中，在旋转蒸发器上旋转30分钟，水化脂质膜；振摇容器，使贴壁的所有脂质从容器壁上脱落，形成均匀乳白的、无可见颗粒的促性腺激素释放激素脂质体悬液；(6)将促性腺激素释放激素脂质体悬液转入10ml试管中，用细胞破碎仪探头低温超声分散，超声时间3秒，间隔3秒，强度100瓦，共进行5分钟，即得白色带乳光胶体溶液；或以水浴式超声仪进行低温超声分散，温度20℃以下，超声效率60％，超声时间5分钟，即得白色带乳光胶体溶液；(7)将得到的白色带乳光胶体溶液反复挤压通过0.45μm微孔滤膜，反复挤压4‑5次，即可制得粒径小于0.45μm的均匀的促性腺激素释放激素脂质体，将其充氮密封后放置于室温保存。