[发明专利]一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的亲和层析复性方法有效
| 申请号： | 201010279445.X | 申请日： | 2010-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN102399291A | 公开（公告）日： | 2012-04-04 |
| 发明（设计）人： | 苏志国;余蓉;谢伟全;张贵锋;刘永东 | 申请（专利权）人： | 中国科学院过程工程研究所;四川大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K1/22 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物制药领域，具体涉及到一种抗凝溶栓双功能融合蛋白——水蛭素12肽-瑞替普酶融合蛋白(HV12p-rPA)的亲和层析复性方法。该亲和层析复性方法的具体步骤为：将还原变性的融合蛋白溶液载入肝素亲和层析柱中，让融合蛋白与肝素亲和介质进行可逆的亲和吸附，在运行一定梯度的条件下将层析柱中的变性缓冲液逐渐置换为复性缓冲液，使融合蛋白在层析柱上停留一定时间，最后用洗脱缓冲液将复性好的融合蛋白洗脱下来。该方法的优点在于：复性所得融合蛋白的蛋白浓度及活性均较高且同时具有纯化作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗凝 溶栓双 功能 融合 蛋白 亲和 层析 复性 方法 | ||
【主权项】：
一种抗凝溶栓双功能融合蛋白的亲和层析复性方法，其特征在于：将水蛭素12肽‑瑞替普酶融合蛋白还原变性液载入用缓冲液I平衡好的肝素亲和层析柱，使该融合蛋白在变性状态下与肝素亲和介质结合，然后在运行0‑5个柱体积的梯度下将缓冲液I逐渐置换为缓冲液II并让融合蛋白在层析柱上停留0‑5个小时，最后用缓冲液III将复性好的融合蛋白从亲和层析柱上洗脱下来。
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