[发明专利]一种干扰素发酵液的制备方法

摘要

本发明公开了一种干扰素发酵液的制备方法，包括下述步骤：(1)用YPD液体培养基复活毕赤酵母菌，作为一级种子；(2)将复活的全部菌液进行扩大培养，作为二级种子；(3)发酵罐实消，进行发酵培养；(4)下罐，并将发酵液进行离心、脱盐处理，然后无菌过滤，即得干扰素发酵液。将发酵液离心，菌体沉淀用白色淀维粉作为载体吸附干燥制备干粉，作为饲料添加剂。本发明的方法能改善固体发酵难于分离菌体的问题，可极大提高纯化效率，而且采用流加式发酵培养使产菌量大大提高，利于工业化大生产。同时酵母菌代谢物也被充分利用。本发明的菌体干粉饲料添加剂在应用于畜禽类时，能促进畜禽类的生长及免疫力提高。

主权项

一种干扰素发酵液的制备方法，其特征在于包括下述步骤：(1)用YPD液体培养基作为种子培养基，28～30℃有氧条件下摇床培养毕赤酵母菌20～24h，成为一级种子；(2)将一级种子液接种于YPD液体培养基二级种子培养基中培养，28～30℃有氧条件下培养毕赤酵母菌20～24h，成为二级种子；(3)发酵罐实消，进行发酵扩大培养：首先将发酵罐的pH电极和溶氧电极进行标定，然后加入发酵培养基、甘油，最后121℃30min高压灭菌，灭菌结束后，培养基温度降至28℃时，用种子流加管接种，确保无菌操作，同时记录发酵罐参数，在28～30℃有氧条件下，采用流加补料发酵方式培养90～120h；(4)发酵结束后，将发酵液经5000rpm 15min离心，上清液即为重组酵母菌经过诱导表达的干扰素发酵液，然后将发酵液进行脱盐、浓缩、无菌过滤处理，即可得到干扰素原液；菌体沉淀用白色淀维粉吸附，在干燥箱中40℃烘干成干粉。