[发明专利]一种从昆虫触角中分离鉴定OBPs基因的方法无效
申请号: | 201010285476.6 | 申请日: | 2010-09-16 |
公开(公告)号: | CN102399773A | 公开(公告)日: | 2012-04-04 |
发明(设计)人: | 谷少华;张永军;张雪莹;吴孔明;郭予元 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68;G06F19/24 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
地址: | 100093 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用SMART技术构建触角cDNA文库和生物信息学方法从苜蓿盲蝽触角中有效分离鉴定气味结合蛋白(Odorant binding proteins,OBPs)基因的方法,利用此方法筛选出了14条苜蓿盲蝽气味结合蛋白基因的核苷酸序列。鉴于气味结合蛋白在昆虫嗅觉识别中的重要作用,本发明所涉及的这些基因可以在昆虫的生物防治中发挥重要的作用。 | ||
搜索关键词: | 一种 昆虫 触角 分离 鉴定 obps 基因 方法 | ||
【主权项】:
一种从昆虫触角中分离鉴定气味结合蛋白基因的方法,其特征在于,包括步骤:(1)利用SMART技术获得触角全长cNDA序列;(2)Sfi酶双酶切所述ds cDNA;(3)利用凝胶层析柱对酶切产物按片段大小进行分离,收集片段长度最长的ds cDNA;(4)步骤(3)的ds cDNA和pDNR‑LIB载体连接,得重组质粒;(5)所述重组质粒转化ElectroMAX DH5α‑E感受态细胞,得到未扩增的初始化cDNA文库;(6)采用生物信息学的方法从cDNA文库中鉴别气味结合蛋白基因。
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