[发明专利]一种吸水链霉菌抗真菌活性物质的提取方法

摘要

本发明涉及一种吸水链霉菌抗真菌活性物质的提取方法，其包括步骤1.吸水链霉菌BS-112(Streptomyces hygroscopicus BS-112)(CGMCC No.3504)通过发酵得到发酵液；2.发酵液离心后的上清液经X-5树脂吸附；3.用70％～80％乙醇对抗真菌活性物质进行解吸；4.收集解吸液，减压蒸发浓缩，冷冻干燥得到抗真菌活性物质的提取物。本发明提供的吸水链霉菌BS-112抗真菌活性物质的提取方法简便、生产周期短、成本低，适于大规模生产。本发明得到的抗真菌活性物质对粮食和饲料中的主要霉变真菌以及多种家蚕和植物病原真菌具有广谱的抗菌活性且毒性低，在食品和饲料防腐剂、家蚕真菌病害和植物真菌病害的生物防治上均具有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。

主权项

一种吸水链霉菌抗真菌活性物质的提取方法，其特征在于包括以下步骤：a、将斜面保存的吸水链霉菌BS‑112转接至PDA培养基平板上，于28～30℃培养72～96小时；将活化的菌种接入种子液培养基中，摇床培养；种子液培养条件为：温度28～30℃，摇床转速180～200转/分，培养时间36～48小时；b、将种子液接种至发酵培养基中，摇瓶发酵，发酵完成后将发酵液离心，收集上清液；发酵培养基为复合培养基，各组分及其质量浓度为：玉米粉1.0％～2.0％，葡萄糖1.5％～2.5％，蛋白胨1.5％～2.5％，MgSO40.5％～1.0％，KH2PO40.5％～1.0％，其余为水；发酵条件为：温度28～30℃，摇床转速180～200转/分，接种量(种子液体积与发酵液体积的百分比)为1％～3％，发酵时间84～96小时；c、将大孔吸附树脂与发酵液离心后的上清液按一定比例混合，在20～30℃下，转速为100～120转/分，振荡吸附2～3小时；d、将吸附后的树脂收集装入层析柱中，先用2～3倍树脂柱体积的去离子水冲洗树脂，再用解吸剂以流速0.8～1.2mL/min进行解吸，从色素带流出开始收集解吸液，收集2.5～3.5倍树脂柱体积后停止收集；e、将收集的解吸液蒸发浓缩，冷冻干燥后所得到的干物即为抗真菌活性物质。