[发明专利]一种有效提高卷叶贝母总生物碱含量的培养方法

摘要

本发明公开了一种有效提高卷叶贝母总生物碱含量的培养方法，该方法采用前体饲喂技术，在卷叶贝母幼嫩再生鳞茎的液体培养过程中，通过添加氨基酸前体物来有效提高卷叶贝母培养物中的总生物碱含量。实验结果显示，培养25天后最终获得的卷叶贝母培养物其总生物碱含量最高可达0.212％，比未加氨基酸前体物的对照组高出52.5％。本发明不仅有效地提高了液体培养中卷叶贝母的总生物碱含量，而且也使得其生物量增殖倍数明显增加，较好地实现了川贝母药材有效组份快速生产的目的。

主权项

一种有效提高卷叶贝母总生物碱含量的培养方法，其特征在于包括下列步骤：(1)卷叶贝母再生鳞茎的获得：将诱导产生的已开始初步分化的紧密愈伤组织切成1.5～2.5cm的小块，转接到产生再生鳞茎的培养基MS+6‑BA 1～2.0mg·L‑1+NAA0.1～0.3mg·L‑1+蔗糖20～60g·L‑1+琼脂5.5～7.0g·L‑1中进行培养，所采用的pH值为5.5～6.5，培养温度15～23℃、每天光照8～16小时、光照强度为1000～1800lx；经38～42d培养后，可获得大量生长良好的再生鳞茎；(2)卷叶贝母再生鳞茎的液体培养：切取(1)步骤获得的直径为3～6mm、未抽芽的卷叶贝母再生鳞茎，转接到加有氨基酸前体物的液体培养基MS+6‑BA2.0mg·L‑1+NAA 0.2～1.0mg·L‑1+蔗糖20～60g·L‑1中进行培养，pH 5.5～6.5，接种量为30～50g·L‑1，培养温度15～23℃、每天光照8～16小时、光照强度为1000～1800lx、摇床转速110～130r·min‑1，培养24～28d后，即获得总生物碱含量高的再生鳞茎，上述氨基酸前体物为苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸中的任意一种，加入量为0.25～1.00mmol·L‑1。