[发明专利]一种帘蛤科线粒体COI基因扩增引物的筛选方法

摘要

一种帘蛤科线粒体COI基因扩增引物的筛选方法，其特征是a、登陆美国国立生物技术信息中心，下载帘蛤科贝类的线粒体全序列；b、将下载的序列用BioEdit比对分析，确定其保守区域；c、在保守区域内用Primer Premier 5设计多对引物并合成；d、提取帘蛤科贝类DNA，将合成的引物在相应反应体系下进行PCR扩增；e、进行电泳检测，筛选出条带单一、扩增效率高的一组鸡尾引物，此组鸡尾引物由一对兼并引物和一对普通引物组成。采用本发明的帘蛤科线粒体COI引物，可以有效的扩增出帘蛤科不同物种的目的片段，对基于COI序列的帘蛤科物种分类、系统发育、系统地理学研究和帘蛤科种质资源保护以及渔业资源管理都具有及其重要的意义。

主权项

一种帘蛤科线粒体COI基因扩增引物的筛选方法，其特征是a、登陆美国国立生物技术信息中心，下载帘蛤科贝类的线粒体全序列；b、将下载的序列用BioEdit软件比对分析，确定序列两端保守区域；c、在确定的保守区域用引物设计软件Primer Premier 5设计多对引物并合成；d、提取帘蛤科贝类DNA，然后将合成的引物在相应反应体系下进行PCR扩增；e、进行琼脂糖凝胶电泳检测，筛选出条带单一、扩增效率高的一组鸡尾引物，此组鸡尾引物由一对兼并引物和一对普通引物组成，其正向引物为COIF‑VLT：ACA AATCAY AAR GAY ATY GG和COIF‑VSA：ACC AAT CAT AAA GAT ATT GG，反向引物为COIR‑VP：CCT GTA GGA ATA GCA ATA AT和COIR‑VJ：CCW GTW GGR ACA GCA ATAAT。