[发明专利]固定化酶膜的制备方法

摘要

固定化酶膜的制备方法，它涉及一种固定化酶的制备方法。本发明解决了现有方法制作得到的固定化酶膜的酶蛋白承载量低以及催化活性低的问题。方法：一、制备甲基丙烯酸甲酯接枝膜；二、制备吸附有己二胺的甲基丙烯酸甲酯接枝膜；三、将吸附有己二胺的甲基丙烯酸甲酯接枝膜浸入到地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶溶液或转谷氨酰胺酶溶液中进行处理即得到固定化酶膜。本发明制作得到的固定化酶膜的酶蛋白承载量好，本发明制作得到的固定化酶膜的地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶的承载量大于35mg/g膜，谷氨酰胺酶的承载量大于20mg/g膜。本发明方法制作得到的固定化酶膜的吸附能力、催化活性以及热稳定性好。

主权项

固定化酶膜的制备方法，其特征在于固定化酶膜的制备方法按照以下步骤进行：一、聚丙烯膜在丙酮中浸泡22～26h，然后在25～35℃条件下干燥22～26h后放入浓度为0.2mol/L二苯甲酮的丙酮溶液中，在氮气保护下用紫外光照射14～16min，紫外光照射强度为90～110μW/cm2，照射距离11～13cm，再将膜自然晾干后浸入质量浓度为10％～30％的甲基丙烯酸甲酯的乙醇溶液中，在28～32℃条件下水浴振荡22～26h，然后在28～32℃的条件下真空干燥22～26h即得到甲基丙烯酸甲酯接枝膜，其中甲基丙烯酸甲酯的乙醇溶液的溶剂是质量浓度为90％～99％的乙醇；二、甲基丙烯酸甲酯接枝膜浸入到质量浓度为13％～17％的己二胺溶液中，在45～55℃条件下振荡35～45min后用去离子水清洗得到了吸附有己二胺的甲基丙烯酸甲酯接枝膜；三、4.5～5.5g的地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶或4.5～5.5g的转谷氨酰胺酶溶解于480～520ml、浓度为0.05mol/L、pH为6.0的磷酸盐缓冲溶液中得到地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶溶液或转谷氨酰胺酶溶液，然后将吸附有己二胺的甲基丙烯酸甲酯接枝膜浸入到地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶溶液或转谷氨酰胺酶溶液中，在3.8～4.2℃条件下反应23～25h，用浓度为0.05mol/L、pH为6.0的磷酸盐缓冲溶液清洗后即得到了固定化酶膜。