[发明专利]一种快速分析浓香型白酒窖池微生物群落结构的方法

摘要

本发明涉及一种快速分析白酒窖池微生物群落结构的免培养生物化学方法，特别是应用于浓香型白酒窖池微生物群落结构的分析。具体方法如下：a)称取一定量的窖泥和糟醅或量取一定体积的黄水，进行前处理；b)加入缓冲液和有机试剂，提取得到脂质组分；c)经硅胶小柱分离和温和甲酯化后，通过有机试剂提取脂肪酸甲酯；d)使用气相色谱-质谱联用仪进行磷脂脂肪酸的定性与定量分析；e)分析样品的微生物群落结构。本发明对白酒窖池微生物群落结构的相关研究，特别是分析浓香型白酒窖池微生物群落结构、微生物群落随不同生产阶段的演替规律，提供了准确、快速、全貌的分析手段，为微生物发酵过程的科学调控以及优质白酒的增产提供有利条件。

主权项

一种快速分析浓香型白酒窖池微生物群落结构的方法，其特征包括以下步骤：1)称(量)取适量窖池样品，经前处理后加入9ml柠檬酸缓冲液、10ml甲醇、10ml氯仿，提取样品中的脂质；2)将步骤1)中获得的有机相经硅胶层析小柱分离，分别用10ml氯仿、10ml丙酮和10ml甲醇，收集含有极性脂的甲醇相；3)将步骤2)得到的含有极性脂的有机相加入1ml甲苯∶甲醇((1∶1)v/v)，1ml 0.2mol/l氢氧化钾‑甲醇，37℃水浴15min，进行碱性条件下温和甲酯化；4)将步骤3)得到的脂肪酸甲酯通过2ml氯仿萃取；5)向步骤4)得到的脂肪酸甲酯中加入正十九酸甲酯(19∶0)定量标准品，进行GC‑MS分析；6)将步骤5)得到的样品磷脂脂肪酸分布数据，基于主成分分析法进行窖池微生物群落结构的分析。