[发明专利]一种植物RNA的提取工艺无效
申请号: | 201010510585.3 | 申请日: | 2010-10-19 |
公开(公告)号: | CN102453709A | 公开(公告)日: | 2012-05-16 |
发明(设计)人: | 于婷婷 | 申请(专利权)人: | 于婷婷 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H21/02;C07H1/08 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 110179 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 一种植物RNA的提取工艺属于化工技术领域,更具体地说,是涉及一种植物RNA的提取工艺。本发明提供了一种操作简单、反应条件温和的植物RNA的提取工艺。本发明采用如下技术方案,工艺步骤为:RNA提取缓冲液的成分有:异硫氰酸胍2~4mol/L、柠檬酸钠(pH 7.0)25~35mmol/L、十二烷基肌氨酸钠0.5~1.0%(W/V)、β-巯基乙醇2~4%(V/V);取预冷的提取缓冲液加入到离心管中,置于冰上;取霸王叶片、根系在装有过量液氮的研钵中充分研磨,用预冷的药匙将霸王叶片、根系粉末转入离心管中,剧烈震荡10min,冰上静置5min;加入醋酸钠、水饱和酚、体积比为20∶1~24∶1的氯仿和异戊醇混合溶液,摇匀,离心20min;加入70~80%的乙醇,洗涤RNA沉淀,室温下干燥10min,即得成品。 | ||
搜索关键词: | 一种 植物 rna 提取 工艺 | ||
【主权项】:
一种植物RNA的提取工艺,其特征在于,本发明采用如下技术方案,工艺步骤为:RNA提取缓冲液的成分有:异硫氰酸胍2~4mol/L、柠檬酸钠(pH 7.0)25~35mmol/L、十二烷基肌氨酸钠0.5~1.0%(W/V)、β‑巯基乙醇2~4%(V/V);取预冷的提取缓冲液加入到离心管中,置于冰上;取霸王叶片、根系在装有过量液氮的研钵中充分研磨,用预冷的药匙将霸王叶片、根系粉末转入离心管中,剧烈震荡10min,冰上静置5min;加入醋酸钠、水饱和酚、体积比为20∶1~24∶1的氯仿和异戊醇混合溶液,摇匀,离心20min;吸取上清液转入另一个离心管中,加入预冷的异丙醇,在‑10~‑20℃下沉淀1.5h;离心,弃上清液,倒置空干,加入70~80%的乙醇,悬浮沉淀;离心,弃上清液,加入70~80%的乙醇,洗涤RNA沉淀,室温下干燥10min,即得成品。
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