[发明专利]一种野牛草ISSR-PCR分子标记体系无效

专利信息
申请号: 201010520022.2 申请日: 2010-10-20
公开(公告)号: CN101985655A 公开(公告)日: 2011-03-16
发明(设计)人: 张蕴薇;杨富裕;魏小兰;邓波;康俊梅;沈紫微;邓由飞 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王加岭;张庆敏
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明属于野牛草分子育种技术领域,具体涉及一套野牛草ISSR-PCR反应最佳体系。本发明提供如下的ISSR-PCR反应体系:每25μL的反应体系中含有1×PCR缓冲液,dNTPs 0.3mM,Taq酶1.0U,如SEQ ID 1~7所示引物中的任一引物0.6μM,Mg2+ 2.0mM,DNA模板50ng;将上述反应混合液按如下程序进行扩增:94℃预变性3min,94℃变性30s,50~60℃退火30s,72℃延伸2min,循环35次,72℃再延伸4min。本发明提供的野牛草ISSR-PCR稳定性好,清晰度高而且增加了条带的丰富度。
搜索关键词: 一种 野牛 issr pcr 分子 标记 体系
【主权项】:
一种野牛草ISSR‑PCR反应体系,其特征在于,每25μL的反应体系中含有1×PCR缓冲液,dNTP 0.3mM,Taq酶1.0U,引物0.6μM,Mg2+ 2.0mM,DNA模板50ng;将上述反应混合液按如下程序进行扩增:94℃预变性3min,94℃变性30s,50~60℃退火30s,72℃延伸2min,循环35次,72℃再延伸4min。
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