[发明专利]一种野牛草ISSR-PCR分子标记体系无效
申请号: | 201010520022.2 | 申请日: | 2010-10-20 |
公开(公告)号: | CN101985655A | 公开(公告)日: | 2011-03-16 |
发明(设计)人: | 张蕴薇;杨富裕;魏小兰;邓波;康俊梅;沈紫微;邓由飞 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明属于野牛草分子育种技术领域,具体涉及一套野牛草ISSR-PCR反应最佳体系。本发明提供如下的ISSR-PCR反应体系:每25μL的反应体系中含有1×PCR缓冲液,dNTPs 0.3mM,Taq酶1.0U,如SEQ ID 1~7所示引物中的任一引物0.6μM,Mg2+ 2.0mM,DNA模板50ng;将上述反应混合液按如下程序进行扩增:94℃预变性3min,94℃变性30s,50~60℃退火30s,72℃延伸2min,循环35次,72℃再延伸4min。本发明提供的野牛草ISSR-PCR稳定性好,清晰度高而且增加了条带的丰富度。 | ||
搜索关键词: | 一种 野牛 issr pcr 分子 标记 体系 | ||
【主权项】:
一种野牛草ISSR‑PCR反应体系,其特征在于,每25μL的反应体系中含有1×PCR缓冲液,dNTP 0.3mM,Taq酶1.0U,引物0.6μM,Mg2+ 2.0mM,DNA模板50ng;将上述反应混合液按如下程序进行扩增:94℃预变性3min,94℃变性30s,50~60℃退火30s,72℃延伸2min,循环35次,72℃再延伸4min。
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