[发明专利]一种体外人胚胎干细胞诱导分化为视网膜色素上皮细胞的试验方法无效
| 申请号： | 201010550487.2 | 申请日： | 2010-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN102465111A | 公开（公告）日： | 2012-05-23 |
| 发明（设计）人： | 薛志刚;范国平 | 申请（专利权）人： | 薛志刚;范国平 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410011 湖南省长沙*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明提供一种体外人胚胎干细胞诱导分化为视网膜色素上皮细胞的试验方法，其步骤为：A)将0.25％胰酶和0.1mg/mL的胶原酶iv配制在含有1mM CaCl2和20％KSR的PBS溶液中，用其消化ES克隆，使其成为5-10个细胞的ES细胞团；B)将ES克隆短期孵育在明胶包被的培养皿中以去除饲养层细胞；C)ES细胞团在非粘附细菌培养皿中以每毫升6.7×102个细胞团的浓度在连续分化培养基中培养。本发明具有方法简便、重复性好、成功率高，全性好，来源丰富经济等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 胚胎 干细胞 诱导 化为 视网膜 色素 上皮细胞 试验 方法 | ||
【主权项】：
一种体外人胚胎干细胞诱导分化为视网膜色素上皮细胞的试验方法，其特征在于，具体步骤为：A)将0.25％胰酶和0.1mg/mL的胶原酶iv配制在含有1mM CaCl2和20％KSR的PBS溶液中，用其消化ES克隆，使其成为5‑10个细胞的ES细胞团。消化后悬浮在含有WNT抑制剂DKK1(100ng/mL)和NODAL抑制剂LEFTY‑A(500ng/mL)的无血清培养基中；B)将ES克隆短期孵育在明胶包被的培养皿中以去除饲养层细胞；C)ES细胞团在非粘附细菌培养皿中以每毫升6.7×102个细胞团的浓度在连续分化培养基中培养。
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