[发明专利]含阳离子氨基酸多肽修饰的纳米磷酸钙基因载体的制备方法无效
| 申请号： | 201010554755.8 | 申请日： | 2010-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN102031269A | 公开（公告）日： | 2011-04-27 |
| 发明（设计）人： | 张健;刘亚纯;向双林;刘谦;胡翔;颜峰 | 申请（专利权）人： | 湖南师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;A61K48/00 |
| 代理公司： | 长沙永星专利商标事务所 43001 | 代理人： | 周咏;米中业 |
| 地址： | 410081 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种含阳离子氨基酸多肽修饰的纳米磷酸钙基因载体的制备方法，包括以下步骤：（1）配制CaCl2水溶液，经过滤灭菌后室温下储存；（2）配制2×HBS水溶液，用NaOH溶液调节pH值，经过滤灭菌后室温下储存；（3）配制含阳离子氨基酸多肽水溶液，调pH值，过滤灭菌后储存；（4）将2×HBS和含阳离子氨基酸多肽溶液按1：0~1：3的体积比混合得到溶液a，再将pEGFP-C1质粒与CaCl2共孵育后，在旋涡震荡条件下将其以大约每秒1滴的速度滴入所述溶液a中,使质粒浓度达20~40μg/mL，放置15~25分钟后得到含阳离子氨基酸多肽改性磷酸钙（CP-CaP）。用本发明方法制备的含阳离子氨基酸多肽修饰的纳米磷酸钙基因载体尺寸稳定、转染效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 阳离子 氨基酸 多肽 修饰 纳米 磷酸钙 基因 载体 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种含阳离子氨基酸多肽修饰的纳米磷酸钙基因载体的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（1）配制150 ~350 mM的CaCl2水溶液，经过滤灭菌后室温下储存；（2）配制2×HBS水溶液，其中含120~160 mM NaCl，1.2~1.6 mM Na2HPO4和30~70 mM HEPES，室温下用NaOH溶液调节到pH 7.00~7.20，经过滤灭菌后室温下储存；（3）配制10~30 mM浓度的含阳离子氨基酸多肽水溶液，调pH值到7.00~7.20，过滤灭菌后0~4 oC储存；（4）将2×HBS和含阳离子氨基酸多肽溶液按1：0~1：3的体积比混合得到溶液a，再将pEGFP‑C1质粒与CaCl2共孵育5~9分钟后，在旋涡震荡条件下将其以大约每秒1滴的速度滴入所述溶液a中,使质粒浓度达20~40 ug/mL，放置15~25分钟后得到含阳离子氨基酸多肽改性磷酸钙CP‑CaP。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于湖南师范大学，未经湖南师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201010554755.8/，转载请声明来源钻瓜专利网。
