[发明专利]松口蘑培养物基因组的制备方法无效
| 申请号： | 201010557760.4 | 申请日： | 2010-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN102061298A | 公开（公告）日： | 2011-05-18 |
| 发明（设计）人： | 曾东方;陈玢 | 申请（专利权）人： | 武汉工程大学 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人： | 唐万荣 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种松口蘑培养物基因组的制备方法。松口蘑培养物基因组的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：1)从松口蘑子实体中分离纯种菌丝体培养物，得到松口蘑的菌丝体培养物；2)保护缓冲液的配制：50mmol/L Tris-HCL缓冲液；50mmol/L乙二胺四乙酸钠；1.4mol/L NaCl；4wt％十六烷基三甲基溴化铵；3)取松口蘑的菌丝体培养物浸没于保护缓冲液中，震荡、液氮冷冻、水浴，重复上述震荡、液氮冷冻、水浴过程1～3次；4)萃取，离心，收集上清液；5)以与上清液等体积的异丙醇对上清液进行沉淀，离心，得到沉淀物；溶于TE缓冲液，保存，得到松口蘑培养物基因组。该方法用料微量、步骤少、耗时短、得率高，制备的松口蘑培养物基因组的质量完整、纯度高。 | ||
| 搜索关键词： | 松口 培养 基因组 制备 方法 | ||
【主权项】：
松口蘑培养物基因组的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：1)从松口蘑子实体中分离纯种菌丝体培养物，得到松口蘑的菌丝体培养物；2)保护缓冲液的配制：50mmol/L Tris‑HCl缓冲液；50mmol/L乙二胺四乙酸钠；1.4mol/LNaCl；4wt％十六烷基三甲基溴化铵；3)取松口蘑的菌丝体培养物浸没于保护缓冲液中，震荡、液氮冷冻、水浴，重复上述震荡、液氮冷冻、水浴过程1～3次；得到松口蘑的菌丝体培养物的裂解液；4)按松口蘑的菌丝体培养物的裂解液与氯仿/异戊醇的体积比为1∶1，选取松口蘑的菌丝体培养物的裂解液、氯仿/异戊醇；其中氯仿/异戊醇由氯仿和异戊醇组成，氯仿与异戊醇的体积比为24∶1；用氯仿/异戊醇萃取松口蘑的菌丝体培养物的裂解液中的松口蘑培养物基因组，离心，收集上清液；5)以与上清液等体积的异丙醇对上清液进行沉淀，离心，得到沉淀物；沉淀物用乙醇洗后风干，溶于TE缓冲液，置‑20℃下保存，得到松口蘑培养物基因组。
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