[发明专利]一种利用红色荧光蛋白用做水稻转化筛选标记的转化方法有效
| 申请号： | 201010563552.5 | 申请日： | 2010-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN102199619A | 公开（公告）日： | 2011-09-28 |
| 发明（设计）人： | 邓兴旺;王海洋;万向元;周君莉 | 申请（专利权）人： | 北京未名凯拓作物设计中心有限公司;北京凯拓迪恩生物技术研发中心有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/65 |
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| 地址： | 100085 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用红色荧光蛋白做筛选标记的转化方法。我们合成了FP基因并根据水稻密码子偏好性进行了修改，用它作为水稻转化和植株再生的筛选标记基因。FP基因由愈伤组织/种皮特异启动子驱动，并与目的基因紧密连接，由农杆菌介导转入水稻胚性愈伤。在共培养后的30天内利用荧光显微镜进行三次筛选。获得的转基因苗利用PCR以及Southern杂交进一步验证，结果表明，转基因苗阳性率高达80%，证明了FP作为植物转化的筛选标记是完全可行的。本发明有效降低了传统筛选标记如抗生素和除草剂抗性基因对环境和食品安全的潜在危害，是一种新型的安全的植物遗传转化筛选系统。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 红色 荧光 蛋白 用做 水稻 转化 筛选 标记 方法 | ||
【主权项】：
一种无抗生素和除草剂标记基因的植物遗传转化方法，该方法包括：a) 一段核苷酸片段，包含荧光蛋白筛选标记基因序列，所述序列紧密连接于愈伤组织和种皮特异性启动子，b) 将权力要求1.a) 所述筛选标记基因转入水稻ms26雄性不育突变体的愈伤组织中，转化载体的T‑DNA区域不含抗生素和除草剂筛选基因，c) 筛选表达荧光的转化细胞，d) 将筛选出的愈伤组织分化成转基因苗。
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