[发明专利]一种β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及重组酶的制备

摘要

本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的β-1，4-内切葡聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该β-内切葡聚糖酶属于糖苷水解酶第12家族，命名为Aus Cel12A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus cel12A。本发明还公开了Aus Cel12A工程菌的构建以及重组Aus Cel12A的高效表达和纯化的方法。制备的重组Aus Cel12A的最适作用温度和pH分别为60℃和5.0，在pH 4.0-7.0、60℃以下稳定，具有较大的工业化生产潜力和经济价值，也为其它β-内切葡聚糖酶的研究奠定了理论基础。

主权项

一种来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株糖苷水解酶第12家族(GH12)的新型β‑1，4‑内切葡聚糖酶基因(Aus cel12A)，其完整mRNA和DNA的核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。