[发明专利]一种芒属植物南荻体胚组培快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种芒属植物南荻体胚组培快速繁殖方法，其步骤是：A、幼穗选取：选取处于颍花原基形成期的幼穗；B、用初代诱导培养基诱导：剪成小段，用7酒精消毒，然后用氯化汞浸泡，无菌水冲洗，将其接种在幼穗的初代诱导培养基上，初代诱导，获得胚性愈伤；C、用生苗培养基继代培养：所获得的胚性愈伤在继代培养基上继代生苗；D、用生根诱导培养基生根诱导：所生幼苗在在生根诱导培养基上诱导生根；E、驯化移栽：在温室内，每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水，移栽到苗圃中，照明，光照，获得了的南荻幼苗。方法易行，操作简便，且分化出愈率和成苗率很高，成活率高，适用于南荻种苗的产业化生产以及为后续转基因奠定基础。

主权项

一种芒属植物南荻体胚组培快速繁殖方法，其步骤是：A、幼穗选取：选取处于颍花原基形成期的幼穗； B、用初代诱导培养基诱导：将其剪成2‑3厘米小段，先用75%体积比的酒精消毒25‑35s，然后用0.1%质量体积比的氯化汞浸泡3‑5分钟，再用无菌水冲洗2‑4次，将其接种在幼穗的初代诱导培养基上，经过30‑35天的初代诱导，获得胚性愈伤，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16个小时，光强为2000LX，初代诱导培养基为：A：MS培养基附加激动素KT1‑2mg/L，2，4二氯苯氧乙酸2,4‑D1‑5mg/L，蔗糖30g/L, PhytagelR 3g/L或B：MS培养基附加激动素KT1‑4mg/L,2，4二氯苯氧乙酸2,4‑D1‑3mg/L，6水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L,蔗糖30g/L， PhytagelR 3g/L；C、用生苗培养基继代培养：所获得的胚性愈伤在继代培养基上继代生苗，30‑35天继代一次，增殖系数为2‑3，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16个小时，光强为2000LX，所述的生苗培养基配方为：A：MS培养基附加激动素KT1‑2mg/L，2，4二氯苯氧乙酸2,4‑D1‑3mg/L，蔗糖30g/L， PhytagelR 3g/L或B：MS培养基附加激动素KT1‑2mg/L，2，4二氯苯氧乙酸2,4‑D01‑2mg/L， 6水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L，蔗糖30g/L， PhytagelR 3g/L，将胚型愈伤转到其中一种生苗培养基之后2‑4天，愈伤开始转绿，6‑8天开始分化出芽，9‑11天形成小幼苗；D、用生根诱导培养基生根诱导：所生幼苗在在生根诱导培养基上诱导生根，培养25‑30天，生根率达40%以上，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16个小时，光强为2000LX，生根诱导培养基为：A：1/2 MS培养基附加激动素KT1‑3mg/L，2，4二氯苯氧乙酸2,4‑D0.5‑2mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR 3g/L或B：MS培养基附加激动素KT1‑3mg/L，2，4二氯苯氧乙酸2,4‑D0.5‑2mg/L，蔗糖30g/L，活性炭3‑8g/L，PhytagelR3g/L，将长到10‑15厘米的幼苗转到任意一种生根培养基上，5天幼苗就会分化出白色或黄色的根；E、驯化移栽：在温室内，将生长健壮的、株高在5‑6厘米的组培苗移栽到由沙子组成的驯化苗圃中驯化，每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水，15－20d后，视幼苗长势，移栽到苗圃中，温室条件为15℃‑25℃，照明使用卤光，光照14‑16个小时，光照强度为2000LX，获得了南荻幼苗。