[发明专利]一种DNA文库及其制备方法、一种DNA测序方法和装置有效

专利信息
申请号: 201010591448.7 申请日: 2010-12-16
公开(公告)号: CN102534811A 公开(公告)日: 2012-07-04
发明(设计)人: 吴逵;阿叁;耿春雨;张秀清;杨焕明 申请(专利权)人: 深圳华大基因科技有限公司;深圳华大基因研究院
主分类号: C40B40/02 分类号: C40B40/02;C40B50/06
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 代理人: 程泳
地址: 518083 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明属于分子生物学领域,涉及一种DNA文库及其制备方法、一种DNA测序方法和装置。具体地,所述DNA文库的制备方法包括如下步骤:一种DNA文库的制备方法,包括如下步骤:1)将样本基因组DNA随机打断为20-50kb的DNA片段;2)下述的步骤A或B:A.将打断的DNA片段两个末端进行补平,并加上捕获标记,然后分离20-50kb的DNA片段;或B.分离打断的20-50kb的DNA片段,然后将DNA片段两个末端进行补平,并加上捕获标记;3)将分离的DNA片段进行环化,得到环状DNA,并除去未环化的DNA片段;4)将环状DNA打断为100-2,000bp的DNA片段;5)从步骤4)中得到的DNA片段中分离带有捕获标记的DNA片段,得到捕获片段。本发明具有简单快速等优点。
搜索关键词: 一种 dna 文库 及其 制备 方法 装置
【主权项】:
一种DNA文库的制备方法,包括如下步骤:1)将样本基因组DNA随机打断为20‑50kb的DNA片段;2)下述的步骤A或B:A.将打断的DNA片段两个末端进行补平,并加上捕获标记,然后分离20‑50kb的DNA片段;或B.分离打断的20‑50kb的DNA片段,然后将DNA片段两个末端进行补平,并加上捕获标记;3)将分离的DNA片段进行环化,得到环状DNA,并除去未环化的DNA片段;4)将环状DNA打断为100‑2,000bp的DNA片段;5)从步骤4)中得到的DNA片段中分离带有捕获标记的DNA片段,得到捕获片段;优选地,还包括6)将捕获片段进行末端补平;优选地,还包括7)将步骤6)中末端补平后的DNA片段进行末端加碱基A和连接测序接头的步骤;优选地,还包括8)将步骤7)中得到的DNA片段进行PCR扩增的步骤。
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