[发明专利]一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法无效
| 申请号： | 201010600520.8 | 申请日： | 2009-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN102154195A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 华进联;朱海鲸 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 陆万寿 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法，从雄性山羊的睾丸的曲细精管得到精原细胞，山羊雄性生殖干细胞的分离纯化方法采用0.2％明胶和Matrigel差速贴壁结合克隆法，将未贴壁的山羊雄性生殖干细胞与贴壁培养的其他细胞区分、分离。分离到的山羊雄性生殖干细胞的培养为MEF有饲养层培养或者无饲养层培养。分离到的山羊雄性生殖干细胞具有ES细胞特性和向神经细胞、心肌细胞和精子样细胞的分化潜能。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 山羊 雄性 生殖 干细胞 体外 分离 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种山羊雄性生殖干细胞的体外培养方法，其特征在于，将山羊雄性生殖干细胞接种到MEF饲养层上，培养液以DMEM高糖培养基为基础培养基，还包括以下组分：体积分数10％的胎牛血清、体积分数10％的血清替代品、2mM谷氨酰胺、0.1mMβ‑巯基乙醇、100IU/ml青霉素、100mg/mL链霉素、质量分数1％的非必需氨基酸、1000IU/ml白血病抑制因子、5～10ng/ml碱性成纤维生长因子、质量分数1％的ITS；2～3天更换一次培养液；或将山羊雄性生殖干细胞接种到Matrigel基质膜4℃包被1小时的塑料培养皿无饲养层培养，培养液为人胚胎干细胞无血清无饲养层培养液，2天更换一次培养液。
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