[发明专利]用环介导等温扩增方法检测诺沃克类病毒的试剂盒及方法

摘要

本发明涉及一种用环介导等温扩增方法检测诺沃克类病毒的试剂盒及方法。其中的试剂包括环介导等温扩增反应液，含有10XThermopol反应缓冲液、300－500uMdNTP、2－4mM硫酸镁、0.8－1.2uM上游内引物、0.8－1.2uM下游内引物、0.2－0.3uM上游外引物、0.2－0.3uM下游外引物；其中10XThermopol反应缓冲液含有200mMpH8.8的三羟基甲基氨基甲烷一盐酸、l00mM氯化钾、l00mM硫酸铵、20mM硫酸镁和1％曲拉通X－100。其优点是具有快速、特异性强、灵敏度高且成本低的用环介导等温扩增方法检测诺沃克类病毒。

主权项

一种用环介导等温扩增方法检测诺沃克类病毒的试剂盒及方法，其特征在于该试剂盒包括：环介导等温扩增反应液A：    含有10X Thermopol反应缓冲液、300－500uM dNTP、2－4mM硫酸镁、0.8－1.2uM上游内引物、0.8－1.2uM下游内引物、0.2－0.3uM上游外引物、0.2－0.3uM下游外引物；    其中10X Thermopol反应缓冲液含有200mM pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷一盐酸、l00mM氯化钾、l00mM硫酸铵、20mM硫酸镁和1％曲拉通X－100；其中，上游内引物为：GAGATYGCGRTCYCCTGTCCATTTTGVTGGCAGGCCATGTTCCG；AGATTGCGATCGCCCTCCCATTTTGCCCAGACAAGARSCMATGTT；CCCAHGTGCTSARGTCTGAGAATTTTTGGATTTTTACGTGCCMAGRCA；CCCAHGTGCTSARGTCTGAGAATTTTCATGAGTTTTATGTGCCAAAGT；下游内引物为：TAAATGATGATGGCGTCTAAGGATTTTRCCTCYGGTACYAGCTGGC；TAAATGATGATGGCGTCTAAGGATTTTTAACCTCCGGYACSAGYTGA；TGDGAATGAAGATGGCGTCGATTTTTTGRCCTCTGGKACGAGGTT；TGTGAATGAAGATGGCGTCGATTTTYYTCTGGGACGAGRCMGGC；TGTGAATGAAGATGGCGTCGATTTTGACCTCATTATTACTTTCTGGC；TGTGAATGAAGATGGCGTCGATTTTTCWTTKTKRMYCTCTGGKACGA；TGTGAATGAAGATGGCGTCGATTTTGYCTCAKTATTRCTYTCTGGC；上游外引物为：GGTTTRGARATGTATGTSCCA；AAGGGGGSYTTGARATSTAC；GAAGGTGGCATGGAYTTTTA；AGTGGTGGTCTGGARTTTTA；ACWGARYTSAARGARGGTGG；GGCATGGTWATCAAAGAAG；GAGATYAAGAGTGGTGGTC；下游外引物为：CATTGRWATWGGSTCAGCT；TGCAAGAGGGTCAGAAG；GWGGCAGTGGTTCAGCA；TCHAGWGCCATBRYCTCRTT；ACSGGYTCAAGAGCCATG；AGCCCCMRCCACRGGYTC；AGCGCCYGCAACKGGG。