[发明专利]柠檬酸及其盐类中耐热嗜酸菌的检测方法

摘要

本发明属于柠檬酸中微生物检测技术领域，尤其涉及柠檬酸及其盐类中耐热嗜酸菌的检测方法。包括下列步骤：1.菌种分离；2.样品处理；3.加热处理；4.膜过滤富集；5.培养及计数；6.柠檬酸及盐类产品检测，在结合耐热嗜酸菌的特性通过大量试验总结出的一种适合柠檬酸及盐类样品的较为有效的耐热嗜酸菌检测方法。本发明填补了柠檬酸及盐类中耐热嗜酸菌检测的空白。可以有效地保证产品质量，提高产品的竞争力。

主权项

柠檬酸及其盐类中耐热嗜酸菌的检测方法，其特征在于：包括下列步骤：1）.菌种分离从柠檬酸钠废母液中经多次分离纯化培养得到耐热嗜酸菌菌株，用接种针挑取上述纯化培养得到的菌株接种到无菌蒸馏水中配成菌悬液，上摇瓶机振摇，作为试验样品；2）.样品处理无菌操作移取试验样品10ml，在无菌容器中加入50mL灭菌蒸馏水稀释溶解，再无菌操作移取试验样品10 ml在另一相同容器中加入50mL灭菌蒸馏水稀释并且插入温度计控温；3）.加热处理将溶解后的样品及对比控温样品置于水浴锅中，待控温样品溶液升至70℃时开始计时，确保样品液的上液位应在水面下面，保持70℃ 20min后迅速取出用室温水降至50℃；4）.膜过滤富集在洁净试验台上安装好过滤装置，用直径50mm，孔径0.45µm水系滤膜真空抽滤，然后用100ml的灭菌蒸馏水冲洗样品容器和过滤器；5）.培养及计数取下滤膜，附在预先准备好的YSG培养基表面，保证滤膜与培养基间接触不留气泡，将培养皿反转，置温度45℃，湿度48～52%培养箱内培养3～5d，3～5d后目测法观察，必要时用放大镜观察以免遗漏，记录滤膜上的菌落数，即为10ml样品中嗜酸耐热菌的菌落数；6）.柠檬酸及盐类产品检测将柠檬酸及盐类10g在盛有50ml灭菌蒸馏水的无菌容器中溶解，作为检查样品，同时用相同方法制备控温样品，将溶解后的样品及对比控温样品置于水浴锅中，待控温样品溶液升至70±1℃时开始计时，确保样品液的上液位应在水面下面，保持70±1℃ 20min后迅速取出用室温水降至50℃，其他步骤同上4～5。