[发明专利]生物法制备的环状亲和标签

摘要

本发明涉及向目的蛋白中引入亲和标签的新方法。本发明提供了一种用于提供包括目的多肽和环状亲和标签的蛋白物质的酶法，包括步骤：(a)提供至少一种前体蛋白物质，该前体包括所述目的蛋白和至少一种通式为X1-标签-X2的基序，其中X1和X2代表侧链可由共价键酶法连接的氨基酸；标签是当环化时能够结合标签的结合配偶体的短氨基酸序列；(b)使所述前体与至少一种能在X1和X2之间形成共价键的酶接触，从而引入包括标签序列的分子内环状结构；以及(c)分离所得的环化蛋白物质。本发明还提供由此获得的蛋白物质及其用途，例如用于制备肽库。

主权项

用于提供包括目的多肽和环状亲和标签的蛋白物质的酶法，包括步骤：a)提供至少一种前体蛋白物质，该前体含有所述目的蛋白和至少一种通式为X1‑标签‑X2的基序，其中X1和X2表示侧链可通过能够在X1和X2残基之间形成硫醚桥的羊毛硫抗生素酶连接的氨基酸；标签是当环化时作为亲和标签的氨基酸序列，所述亲和标签可将蛋白物质捕获到该标签的特异性结合配偶体上；且其中所述基序N端带有羊毛硫抗生素前导序列；b)使该前体与至少一种能在X1和X2之间形成硫醚桥的羊毛硫抗生素酶接触，从而引入含有标签序列的分子内环状结构；以及c)分离所得的环化的蛋白物质。