[发明专利]使用化学控制的氧化还原态重折叠蛋白质有效
申请号: | 201080028756.7 | 申请日: | 2010-06-21 |
公开(公告)号: | CN102482321A | 公开(公告)日: | 2012-05-30 |
发明(设计)人: | J·E·舒尔茨;R·哈特;R·N·基纳三世 | 申请(专利权)人: | 安姆根有限公司 |
主分类号: | C07K1/113 | 分类号: | C07K1/113 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李进;郭文洁 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本发明公开了一种将在非哺乳动物细胞中表达并以2.0g/L或更高的浓度存在的蛋白重折叠的方法。所述方法包括确定巯基对比率和氧化还原缓冲强度以获得以下条件,在该条件下实现以2.0g/L或更高的浓度有效折叠并且该条件可在包括商业规模在内的体积范围内使用。 | ||
搜索关键词: | 使用 化学 控制 氧化 还原 折叠 蛋白质 | ||
【主权项】:
一种将在非哺乳动物表达系统中表达并且在一定体积中以2.0g/L或更高的浓度存在的蛋白重折叠的方法,包括:(a)将所述蛋白与重折叠缓冲液接触以形成重折叠混合物,所述重折叠缓冲液包含氧化还原组分以及下列中的一种或多种:(i)变性剂;(ii)聚集抑制剂;和(iii)蛋白稳定剂;所述氧化还原组分包含具有0.001至100的范围的最终巯基对比率和2mM或更高的氧化还原缓冲强度;(b)将所述重折叠混合物孵育;以及(c)将所述蛋白自所述重折叠混合物分离。
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