[发明专利]在巴斯德毕赤氏酵母中生产缺乏与针对宿主细胞抗原的抗体的可检测交叉结合活性的蛋白质的方法

摘要

描述了在巴斯德毕赤氏酵母中生产缺乏与针对宿主细胞抗原制得的抗体的可检测交叉结合活性的蛋白质和糖蛋白的方法。特别地，描述了下述方法，其中不展现对于N-聚糖或O-聚糖的β-甘露糖基转移酶2活性以及不展现选自β-甘露糖基转移酶1、3和4活性的至少一种活性的重组巴斯德毕赤氏酵母菌株来生产重组蛋白质和糖蛋白。这些重组巴斯德毕赤氏酵母菌株可以产生这样的蛋白质和糖蛋白，所述蛋白质和糖蛋白缺乏在其上的可检测的α-甘露糖苷酶抗性β-甘露糖残基，因而，缺乏与针对宿主细胞抗原的抗体的交叉结合活性。进一步描述的是在巴斯德毕赤氏酵母中生产缺乏与针对宿主细胞抗原的抗体的可检测的交叉结合活性的双唾液酸化人促红细胞生成素的方法。

主权项

一种在巴斯德毕赤氏酵母中生产重组糖蛋白的方法，所述重组糖蛋白缺乏与针对宿主细胞抗原制得的抗体的可检测的交叉结合活性，所述方法包括：（a） 提供重组巴斯德毕赤氏酵母宿主细胞，其不展现对于N‑聚糖或O‑聚糖的β‑甘露糖基转移酶2活性，不展现对于N‑聚糖或O‑聚糖的选自β‑甘露糖基转移酶1活性和β‑甘露糖基转移酶3活性的至少一种活性，并且其包括编码所述重组糖蛋白的核酸分子；（b） 在对表达所述重组糖蛋白有效的条件下在培养基中生长所述宿主细胞；和（c） 从所述培养基中回收所述重组糖蛋白，以产生缺乏与针对宿主细胞抗原制得的抗体的可检测的交叉结合活性的重组糖蛋白。