[发明专利]诱变方法有效
申请号: | 201080058248.3 | 申请日: | 2010-12-21 |
公开(公告)号: | CN102695795A | 公开(公告)日: | 2012-09-26 |
发明(设计)人: | T.霍维南;U.拉明马基;E-C.布罗克曼;M.维尼艾南 | 申请(专利权)人: | 图尔库大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李慧惠;郭文洁 |
地址: | 芬兰*** | 国省代码: | 芬兰;FI |
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摘要: | 本发明提供了一种诱变方法,其中在引物延伸反应中用至少一种诱变引物诱变核酸分子,并随后通过滚环扩增(RCA)进行扩增。所述方法包括下述步骤:通过链置换DNA聚合酶,仅导致突变链的选择性扩增。在多次引发的RCA中产生突变的质粒的多个拷贝,并转化得到的DNA进行使用。所述方法适用于突变单链和双链DNA。本发明也提供了用于诱变方法中的试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 诱变 方法 | ||
【主权项】:
一种诱变核酸分子的方法,所述方法包括下述步骤:a)提供模板,所述模板包含在环状DNA载体中的靶核酸分子,b)提供至少一种诱变引物,其含有要导入靶核酸分子中的突变,c)使所述诱变引物与靶核酸分子退火,d)进行引物延伸和连接反应,以形成双链的异源双链体,其中一条链是模板链,另一条链是新合成的突变链,e)使模板链不适于滚环扩增(RCA),f)通过多次引发的滚环扩增来扩增所述突变链,和g)将扩增的DNA转化至合适的宿主中。
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